抗炎症活性によるNLRP3PyDホモオリゴマー化阻害剤の同定

インフラマソームは、炎症反応の重要な要素を表すマルチタンパク質複合体です。最も特性化された複合体であるNLRP3インフラマソームの調節不全は、多発性硬化症、2型糖尿病、アルツハイマー病、癌などの疾患の病因に関連しています。インフラマソーム複合体のさまざまな成分に特異的な分子阻害剤は存在しますが、現在報告されている阻害剤は、特異的にNLRP3Pydホモオリゴマー化を標的としていません。本研究では、スプリット - ルシフェラーゼ補体アッセイを使用してミリアスレンライブラリーから小分子をスクリーニングした後、QM380およびQM381のNLRP3PyDホモオリゴマー化阻害剤としての同定について説明します。我々の結果は、これらのNLRP3PyD阻害剤がASCスペック形成を妨害し、炎症誘発性サイトカインIL1-βの放出を阻害し、ピロ脱湿細胞死を減少させることを示しています。QM380およびQM381およびPYDドメインを使用した分光技術と計算ドッキング分析を使用して、実験結果を確認し、NLRP3PyDホモインタラクションの阻害の根底にある可能性のあるメカニズムを予測しました。

Inflammasomes are multiprotein complexes that represent critical elements of the inflammatory response. The dysregulation of the best-characterized complex, the NLRP3 inflammasome, has been linked to the pathogenesis of diseases such as multiple sclerosis, type 2 diabetes mellitus, Alzheimer's disease, and cancer. While there exist molecular inhibitors specific for the various components of inflammasome complexes, no currently reported inhibitors specifically target NLRP3PYD homo-oligomerization. In the present study, we describe the identification of QM380 and QM381 as NLRP3PYD homo-oligomerization inhibitors after screening small molecules from the MyriaScreen library using a split-luciferase complementation assay. Our results demonstrate that these NLRP3PYD inhibitors interfere with ASC speck formation, inhibit pro-inflammatory cytokine IL1-β release, and decrease pyroptotic cell death. We employed spectroscopic techniques and computational docking analyses with QM380 and QM381 and the PYD domain to confirm the experimental results and predict possible mechanisms underlying the inhibition of NLRP3PYD homo-interactions.