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グルタミン酸デカルボキシラーゼ(GAD; E.C. 4.1.1.15)は、脊椎動物中枢神経系の主要な阻害神経伝達物質であるグルタミン酸をガンマアミノ酪酸(GABA)に変換します。このレポートでは、ラムダGT-11脳補完DNA発現ライブラリーの免疫学的スクリーニングによるGAD相補性DNAクローンの分離について説明しています。このクローンによって生成された融合タンパク質は、グルタミン酸のGABAおよび二酸化炭素への変換を触媒し、GADとしての同一性を確認します。ベータガラクトシダーゼに対する抗体は、溶液からGAD酵素活性を除去し、この活性が融合タンパク質に関連していることを示しています。免疫ブロット実験では、3つの利用可能な3つの抗血清すべてが融合ポリペプチドと、脳抽出物の2つの主要なポリペプチド(分子サイズ、60,000および66,000ダルトン)と反応しました。
グルタミン酸デカルボキシラーゼ(GAD; E.C. 4.1.1.15)は、脊椎動物中枢神経系の主要な阻害神経伝達物質であるグルタミン酸をガンマアミノ酪酸(GABA)に変換します。このレポートでは、ラムダGT-11脳補完DNA発現ライブラリーの免疫学的スクリーニングによるGAD相補性DNAクローンの分離について説明しています。このクローンによって生成された融合タンパク質は、グルタミン酸のGABAおよび二酸化炭素への変換を触媒し、GADとしての同一性を確認します。ベータガラクトシダーゼに対する抗体は、溶液からGAD酵素活性を除去し、この活性が融合タンパク質に関連していることを示しています。免疫ブロット実験では、3つの利用可能な3つの抗血清すべてが融合ポリペプチドと、脳抽出物の2つの主要なポリペプチド(分子サイズ、60,000および66,000ダルトン)と反応しました。
Glutamate decarboxylase (GAD; E.C. 4.1.1.15) converts glutamate to gamma-aminobutyric acid (GABA), the major inhibitory neurotransmitter in the vertebrate central nervous system. This report describes the isolation of a GAD complementary DNA clone by immunological screening of a lambda gt-11 brain complementary DNA expression library. The fusion protein produced by this clone catalyzes the conversion of glutamate to GABA and carbon dioxide, confirming its identity as GAD. Antibodies to beta-galactosidase remove GAD enzymatic activity from solution, showing that this activity is associated with the fusion protein. In immunoblotting experiments all three available antisera to GAD reacted with the fusion polypeptide and with two major polypeptides (molecular size, 60,000 and 66,000 daltons) in brain extracts.
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