治療的モノクローナル抗体精製のための活性炭によるウイルスクリアランス

私たちの以前の研究では、タンパク質A親和性クロマトグラフィーの代替として、治療モノクローナル抗体（MAB）の精製プロセスで活性炭（AC）が採用されました。さらに、ACフィルターを使用して革新的な柱フリーフロースルー精製プロセスを確立しました。これらの調査では、従来のタンパク質Aプラットフォーム精製プロセスと比較して、不純物の効果的なクリアランス（高分子量種、低分子量種、宿主細胞タンパク質、およびDNA）が観察されました。この研究では、確立されたACプロセス（ACフィルター）のウイルス除去能力を、2つのモデルウイルス、マウス白血病ウイルス（MULV）と微量ウイルスのマウス（MVM）の2つのろ過法（単一パスろ過とろ過と微小ろ型ろ過と微小なウイルス（MVM）を使用して調査しました。再循環ろ過）3種類のmabを使用します。すべてのMABでMULVとMVM（> 3ログ還元係数、LRF）の両方の効果的なクリアランスが見つかりました。ろ過方法だけでなく、再循環時間もLRFに影響を与えなかったため、単一パスろ過のみで3 LRFを超えるウイルス除去を達成できます。これらの結果から、ACはMAB精製プロセスのウイルス除去ユニットの操作の有望な候補になると予想されます。

In our previous study, activated carbon (AC) was employed in the purification process of therapeutic monoclonal antibody (mAb) as a replacement for Protein A affinity chromatography. In addition, we established an innovative column-free flow-through purification process using AC filter. In these investigations, the effective clearance of impurities (high-molecular-weight species, low-molecular-weight species, host cell proteins, and DNA) was observed compared to the conventional Protein A platform purification process. In this study, virus removal capability of our established AC process (AC filter) was investigated using two model viruses, Murine Leukemia Virus (MuLV) and Minute Virus of Mice (MVM) with the combination of two filtration methods (single-pass filtration and re-circulation filtration) using three kinds of mAbs. We found effective clearance of both MuLV and MVM (>3 log reduction factor, LRF) in all mAbs. Not only filtration method but also re-circulation duration didn't affect LRF, and >3 LRF of virus removal could be achieved by only single-pass filtration. From these results, it is expected that AC will be a promising candidate for the virus removal unit operation for mAb purification processes.