L乳酸由来トランスシアリダーゼ抗原とC-Di-AMPによる鼻免疫は、急性口腔Tクルジ感染から保護します

チャガス病の新世代のワクチンは、トリパノソーマクルジ寄生虫を効果的に制御するために、体液性と細胞の両方の反応を誘発することに焦点を合わせています。ワクチン製剤の投与は、粘膜レベルおよび全身レベルで特定の反応を誘導できる非経口ルートよりも優位性があります。この研究の目的は、2つのトランスシアリダーゼ（TS）ベースの粘膜ワクチンの免疫原性と予防効果を、鼻腔内投与したT. cruziと比較することを目的としています。ワクチンは、2つの異なるアジュバントで配合された乳酸鎖乳腺で発現したTSの組換え断片で構成されていました。1つ目は、免疫刺激粒子（ISPA、Iscomatrix様アジュバント）でしたが、2つ目は粘膜レベルで免疫刺激特性を示したジヌクレオチドC-Di-AMPでした。BALB/Cマウスは、各製剤（TS+ISPAまたはTS+C-DI-AMP）およびTS単独またはビヒクル（生理食塩水）で、各製剤（TS+ISPAまたはTS+C-DI-AMP）で、鼻腔内（3回、1回、2週間ごとに1回）免疫しました。最後の免疫の15日後、TS+ISPAまたはTS+C-DI-AMPの両方が、血漿抗TS IgG2A力価とIgG2A/IgG1比の増加とTSに対する細胞応答の増加によって判断されるように、明らかな全身体液および細胞の応答を誘導しました。TS+C-Di-AMPからの血漿由来抗体は、in vitroでT. cruziの浸潤能力も阻害します。さらに、TS+C-Di-AMPグループでは、特定の分泌IGAがより強化されました。ワクチン接種された動物では、経口T. Cruzi-Challengeによって保護効果が証明されました。寄生虫症の制御は、すべてのワクチン接種グループがCD8+IFN-γ+T細胞数の増強を示したにもかかわらず、TS+C-Di-AMPでワクチン接種された動物によってのみ達成されました。さらに、組織の寄生虫負荷、臨床症状、および組織損傷の減少の大幅な減少において、急性期に反射されました。TS+C-DI-AMPによって誘発されるより良い予防能力は、TS+ISPAおよびTS+C-DI-AMPグループが同様の免疫原性とCD8+IFN-γ+T細胞応答を示すため、中和血漿抗体と粘膜IgAの増強レベルの誘導に関連していました。したがって、Ts+C-Di-Amp製剤は、T。cruziに対する予防の有望な戦略として現れます。

The new generation of vaccines for Chagas disease, are focused to induce both humoral and cellular response to effectively control Trypanosoma cruzi parasites. The administration of vaccine formulations intranasally has the advantage over parenteral routes that can induce a specific response at mucosal and systemic levels. This study aimed to evaluate and compare the immunogenicity and prophylactic effectiveness of two Trans-sialidase (TS)-based mucosal vaccines against T. cruzi administered intranasally. Vaccines consisted of a recombinant fragment of TS expressed in Lactococcus lactis formulated in two different adjuvants. The first, was an immunostimulant particle (ISPA, an ISCOMATRIX-like adjuvant), while the second was the dinucleotide c-di-AMP, which have shown immunostimulant properties at the mucosal level. BALB/c mice were immunized intranasally (3 doses, one every two weeks) with each formulation (TS + ISPA or TS + c-di-AMP) and with TS alone or vehicle (saline solution) as controls. Fifteen days after the last immunization, both TS + ISPA or TS + c-di-AMP induced an evident systemic humoral and cellular response, as judged by the increased plasma anti-TS IgG2a titers and IgG2a/IgG1 ratio and enhanced cellular response against TS. Plasma derived antibodies from TS + c-di-AMP also inhibit in vitro the invasion capacity of T. cruzi. Furthermore, specific secretory IgA was more enhanced in TS + c-di-AMP group. Protective efficacy was proved in vaccinated animals by an oral T. cruzi-challenge. Parasitemia control was only achieved by animals vaccinated with TS + c-di-AMP, despite all vaccinates groups showed enhanced CD8+IFN-γ+ T cell numbers. In addition, it was reflected during the acute phase in a significant reduction of tissue parasite load, clinical manifestations and diminished tissue damage. The better prophylactic capacity elicited by TS + c-di-AMP was related to the induction of neutralizing plasma antibodies and augmented levels of mucosal IgA since TS + ISPA and TS + c-di-AMP groups displayed similar immunogenicity and CD8+IFN-γ+ T-cell response. Therefore, TS + c-di-AMP formulation appears as a promising strategy for prophylaxis against T. cruzi.