血液浸透馬子宮のex vivoモデルの評価

子宮の病理は、牝馬の不妊の最も一般的な原因です。この研究の目的は、馬の子宮のex vivo血液浸透モデルを確立し、モデルの適用性に対する異なるサイクル段階（発情、発情、および貧困）の可能な影響を調査することを目的としています。子宮（n = 13）を食器食用で収集し、保存溶液で洗い、氷上で実験室に輸送し、自己血液で6時間灌流しました（n = 12）。ネガティブコントロールのために、記載されているように1つの子宮を処理しましたが、6時間灌流せずに残されました。サイクル段階は、グラフィア卵胞またはcorpora luteaの存在のための卵巣の検査と血漿プロゲステロン濃度の分析によって決定されました（発情：n = 4; diestrus：n = 4;侵入：n = 4）。6時間の灌流後、ソノマイクロメトリー結晶を子宮筋層に埋め込み、自発的収縮と0.5 Iuオキシトシンに対する反応を記録しました。動脈および静脈灌流液の分析は、グルコース消費、乳酸生成、pH、乳酸デヒドロゲナーゼ活性（LDH）、およびカリウム濃度（K+）を決定するために1時間ごとに実施しました。生検サンプルは、屠殺直後、輸送後、平衡後、4、5、および6時間の灌流後、灌流系から除去した直後に得られました。子宮のグルコース消費量と乳酸産生は時間とともに増加しました（P <0.05）が、サイクル段階間に差は検出されませんでした。pH（動脈および静脈）は時間とともに増加しました（p <0.05）。LDHの変更は観察されませんでした。K+は灌流の4時間後に増加しました（P <0.05）が、サイクル段階の影響を受けませんでした。自発的な収縮は、すべての灌流子宮に存在していましたが、陰性対照における筋膜活性は灌流の2番目の時間に限定されていました。オキシトシン投与後の収縮振幅と期間に対するサイクル段階の影響は検出されませんでした。サイクルステージは、周波数に影響しませんでした（灌流5時間後を除く）、振幅、収縮期、または浮腫の形成。組織学は、4、5、および6時間の灌流時間後に子宮内膜毛細血管の輻輳を明らかにしました。結論として、ex vivoモデルは、馬の子宮の機能を6時間サポートすることができました。しかし、子宮内膜の生存率と組織形態学は、4時間の灌流後に損なわれているように見えました。モデルの適用性に対するサイクルステージの影響はありませんでした。

Uterine pathologies are the most common causes of infertility in mares. This study aimed to establish an ex vivo blood-perfused model for equine uteri and investigate the possible effects of different cycle stages (estrus, diestrus and anestrus) on the applicability of the model. Uteri (n = 13) were collected at an abattoir, flushed with preservation solution, transported to the laboratory on ice, and isolated perfused with autologous blood for 6 h (n = 12). For negative control, one uterus was handled as described but left without perfusion for 6 h. The cycle stage was determined by examination of the ovaries for the presence of Graafian follicles or corpora lutea and analysis of plasma progesterone concentration (estrus: n = 4; diestrus: n = 4; anestrus: n = 4). Sonomicrometry crystals were implanted into the myometrium to record spontaneous contractions and the response to 0.5 IU oxytocin after 6 h of perfusion. Analyses of the arterial and venous perfusate were performed every hour to determine glucose consumption, lactate production, pH, lactate dehydrogenase activity (LDH), and potassium concentration (K+). Biopsy samples were obtained directly after slaughter, after transportation, after equilibration, after 4, 5, and 6 h of perfusion, and immediately after removal from the perfusion system. The uteri's glucose consumption and lactate production increased over time (p < 0.05), but no differences among cycle stages were detected. pH (arterial and venous) increased over time (p < 0.05). No changes for LDH were observed. K+ increased after 4 h of perfusion (p < 0.05), but was unaffected by the cycle stage. Spontaneous contractions were present in all perfused uteri, but myometrial activity in the negative control was limited to the 2nd hour of perfusion. No effects of cycle stage on contraction amplitude and duration after oxytocin administration were detected. The cycle stage did not affect frequency (except after 5 h of perfusion), amplitude, duration of contractions, or edema formation. Histology revealed congestion of endometrial capillaries after 4, 5, and 6 h perfusion time. In conclusion, the ex vivo model was capable of supporting the functionality of equine uteri for 6 h. However, viability and histomorphology of the endometrium appeared to be impaired after 4 h of perfusion. Effects of the cycle stage on the applicability of the model were absent.