炎症性腸疾患患者の血清中の特定のカルプロテクチンネオエピトープ[CPA9-HNE]は、好中球の活性と内視鏡重症度に関連しています

背景と目的：内視鏡検査と糞便カルプロテクチン[糞便CP]の使用は、炎症性腸疾患[IBD]患者による疾患活動を評価するための最も恩恵のない方法の1つです。糞便サンプルの取り扱い/処理も実用的ではありません。したがって、好中球活性と好中球細胞外トラップ[NET] - 症状を定量化し、非侵害的な方法を提案することを目的とした、新規新エピトープ血清カルプロテクチン酵素免疫吸着アッセイ[ELISA]、CPA9-HNEを開発しようとしました。IBD患者の疾患活動性の監視。 方法：in vitro切断は、カルプロテクチン[S100A9/S100A8]とヒト好中球エラスターゼ[HNE]と混合し、新規HNE由来のカルプロテクチンネオエピトープ[CPA9-HNE]をELISA開発のための質量分光測定によって特定しました。CPA9-HNE ELISAは、潰瘍性大腸炎患者[UC、n = 43]、クローン病[CD、n = 93]、および健康な被験者[HS、n = 23]の患者からのex in vivo活性化好中球および血清サンプルの上清で定量化されました。。比較のために、糞便CPとMRP8/14のバイオマーカーも測定されました。 結果：CPA9-HNEは、活性化された好中球に特異的でした。血清CPA9-HNEレベルは、HSよりもCD [P <0.0001]およびUC [P <0.0001]患者で4倍高かった。CPA9-HNEは、単純な内視鏡スコア[SES] -CDスコア[r = 0.61、P <0.0001]、MES [r = 0.46、p = 0.0141]、およびフルマヨのスコア[r = 0.52、p = 0.00133]。CPA9-HNEは、内視鏡的寛解と中程度/重度の疾患活動性のCD患者とUC患者を区別することができました（CD：曲線下面積[AUC] = 0.82 [P = 0.0003]、UC：AUC = 0.87 [P = 0.0004]））。CPA9-HNEのパフォーマンスは、糞便CPの性能よりも等量があるか、わずかに優れていました。 結論：血清CPA9-HNEレベルは、CDおよびUC患者と非常に関連していた。CPA9-HNEは、SES-CDスコアと完全なメイヨースコアと相関しており、疾患活動性との強い関連性を示しています。

BACKGROUND AND AIMS: Endoscopy and the use of faecal calprotectin [faecal CP] are among the least-favoured methods for assessing disease activity by inflammatory bowel disease [IBD] patients; the handling/processing of faecal samples is also impractical. Therefore, we sought to develop a novel neo-epitope serum calprotectin enzyme-linked immunosorbent assay [ELISA], CPa9-HNE, with the aim of quantifying neutrophil activity and neutrophil extracellular trap [NET]-osis and proposing a non-invasive method for monitoring disease activity in IBD patients. METHODS: In vitro cleavage was performed by mixing calprotectin [S100A9/S100A8] with human neutrophil elastase [HNE], and a novel HNE-derived calprotectin neo-epitope [CPa9-HNE] was identified by mass spectrometry for ELISA development. The CPa9-HNE ELISA was quantified in supernatants from ex vivo activated neutrophils and serum samples from patients with ulcerative colitis [UC, n = 43], Crohn's disease [CD, n = 93], and healthy subjects [HS, n = 23]. For comparison, faecal CP and MRP8/14 biomarkers were also measured. RESULTS: CPa9-HNE was specific for activated neutrophils ex vivo. Serum CPa9-HNE levels were 4-fold higher in CD [p <0.0001] and UC [p <0.0001] patients than in HS. CPa9-HNE correlated well with the Simple Endoscopic Score [SES]-CD score [r = 0.61, p <0.0001], MES [r = 0.46, p = 0.0141], and the full Mayo score [r = 0.52, p = 0.0013]. CPa9-HNE was able to differentiate between CD and UC patients in endoscopic remission and moderate/severe disease activity (CD: area under the curve [AUC] = 0.82 [p = 0.0003], UC: AUC = 0.87 [p = 0.0004]). The performance of CPa9-HNE was equipotent or slightly better than that of faecal CP. CONCLUSIONS: Serum CPa9-HNE levels were highly associated with CD and UC patients. CPa9-HNE correlated with the SES-CD score and the full Mayo score, indicating a strong association with disease activity.