タンパク質キナーゼCおよびホスファチジルセリンは、細胞骨格およびシナプス後密度密度標本を濃縮したMR 110,000/115,000ポリペプチドに結合します

ラット脳およびヒト赤血球からのニトロセルロースイモビル化ポリペプチドへのプロテインキナーゼCの選択的結合を調査しました。結合した酵素は、単一特異的プロテインキナーゼC抗体を使用して、または放射性標識酵素を使用して免疫化学的に検出されました。ホスファチジルセリン（PS）の存在下で、110,000および115,000の結合プロテインキナーゼCのMR値を持つ赤血球膜からの2つのポリペプチドが、細胞骨格画分で非常に濃縮されていました。MR MRの顕著なプロテインキナーゼC結合ポリペプチドは、脳細胞質、シナプス後密度、および核でも明らかでした。14C-リン脂質を含む電気泳動ブロットのオーバーレイは、プロテインキナーゼC結合ポリペプチドもPSに結合したが、他のリン脂質ではないことを明らかにした。プロテインキナーゼCとPSの両方の結合は、MR 110,000/115,000ポリペプチドとキナーゼ自体のリン酸化後に著しく阻害されました。タンパク質キナーゼCの膜およびリン脂質 - 細胞骨格相互作用への結合に対する結果の関連性について説明します。

The selective binding of protein kinase C to nitrocellulose-immobilized polypeptides from rat brain and human erythrocytes was investigated. Bound enzyme was detected immunochemically with a monospecific protein kinase C antibody, or by using radiolabeled enzyme. Two polypeptides from erythrocyte membranes with Mr values of 110,000 and 115,000 bound protein kinase C in the presence of phosphatidylserine (PS) and were highly enriched in the cytoskeletal fraction. A prominent protein kinase C-binding polypeptide at Mr about 115,000 was also evident in brain cytoplasm, postsynaptic densities, and nuclei. Overlays of electrophoretic blots with 14C-phospholipids revealed that the protein kinase C-binding polypeptides also bound PS but not other phospholipids. The binding of both protein kinase C and PS was markedly inhibited after phosphorylation of the Mr 110,000/115,000 polypeptides with the kinase itself. The relevance of the results to the binding of protein kinase C to membranes and to phospholipid-cytoskeletal interactions is discussed.