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背景:108 mmの塩化ナトリウム(NaCl)を含む培地と比較して、NaClを減少させた単純な培地を使用してin vitro成熟(IVM)を使用すると、PIG卵母細胞の細胞質の成熟と胚発生が増加します。 目的:この研究は、IVMに対するNaClの減少を含む複雑な培地の効果とブタ卵母細胞の胚発生の影響を決定します。 方法:61.6(61αMEM)または108(108αMEM)MM NaClを添加した最小限の培地イーグルアルファ修飾(αMEM)で熟成し、ポリビニルアルコール(PVA)(αMEMP)またはブタ毛包液(PFF)(αMemfffigを含む))。Medium-199(M199)は、従来のIVMのコントロールとして機能しました。核尿細胞の拡大、核成熟、卵細胞内グルタチオン(GSH)含有量、ペリビテリン容量のサイズ(PVS)、およびパルテン形成(PA)および体細胞核移植(SCNT)後の胚発生は、IVM後に評価されました。 結果:PVAまたはPFFの補給に関係なく、61αMEMで成熟した卵母細胞は、卵母細胞内含有量とPVSの幅の増加を示し(P <0.05)(P <0.05)、PAおよびSCNT後の胚盤胞形成(P <0.05)の増加(P <0.05)、卵形と比較して、108αmempとM199で熟成。PFF濃縮αMEMの条件下では、61αMEMFで成熟したSCNT卵母細胞は、108αMEMFおよびM199の成熟と比較して、より高い胚盤胞形成を示しました(P <0.05)。 結論:NaCl(61.6 mm)の減少を補完するαMEMのIVMは、PAおよびSCNTに続いて胚発生能力を高め、卵母細胞の成熟の改善に起因します。
背景:108 mmの塩化ナトリウム(NaCl)を含む培地と比較して、NaClを減少させた単純な培地を使用してin vitro成熟(IVM)を使用すると、PIG卵母細胞の細胞質の成熟と胚発生が増加します。 目的:この研究は、IVMに対するNaClの減少を含む複雑な培地の効果とブタ卵母細胞の胚発生の影響を決定します。 方法:61.6(61αMEM)または108(108αMEM)MM NaClを添加した最小限の培地イーグルアルファ修飾(αMEM)で熟成し、ポリビニルアルコール(PVA)(αMEMP)またはブタ毛包液(PFF)(αMemfffigを含む))。Medium-199(M199)は、従来のIVMのコントロールとして機能しました。核尿細胞の拡大、核成熟、卵細胞内グルタチオン(GSH)含有量、ペリビテリン容量のサイズ(PVS)、およびパルテン形成(PA)および体細胞核移植(SCNT)後の胚発生は、IVM後に評価されました。 結果:PVAまたはPFFの補給に関係なく、61αMEMで成熟した卵母細胞は、卵母細胞内含有量とPVSの幅の増加を示し(P <0.05)(P <0.05)、PAおよびSCNT後の胚盤胞形成(P <0.05)の増加(P <0.05)、卵形と比較して、108αmempとM199で熟成。PFF濃縮αMEMの条件下では、61αMEMFで成熟したSCNT卵母細胞は、108αMEMFおよびM199の成熟と比較して、より高い胚盤胞形成を示しました(P <0.05)。 結論:NaCl(61.6 mm)の減少を補完するαMEMのIVMは、PAおよびSCNTに続いて胚発生能力を高め、卵母細胞の成熟の改善に起因します。
BACKGROUND: Compared to medium containing 108 mM sodium chloride (NaCl), in vitro maturation (IVM) using a simple medium with reduced (61.6 mM) NaCl increases the cytoplasmic maturation and embryonic development of pig oocytes. OBJECTIVES: This study determines the effect of a complex medium containing reduced NaCl on the IVM and embryonic development of pig oocytes. METHODS: Pig oocytes were matured in Minimum Essential Medium Eagle-alpha modification (αMEM) supplemented with 61.6 (61αMEM) or 108 (108αMEM) mM NaCl, and containing polyvinyl alcohol (PVA) (αMEMP) or pig follicular fluid (PFF) (αMEMF). Medium-199 (M199) served as the control for conventional IVM. Cumulus cell expansion, nuclear maturation, intra-oocyte glutathione (GSH) contents, size of perivitelline space (PVS), and embryonic development after parthenogenesis (PA) and somatic cell nuclear transfer (SCNT) were evaluated after IVM. RESULTS: Regardless of PVA or PFF supplementation, oocytes matured in 61αMEM showed increased intra-oocyte GSH contents and width of PVS (p < 0.05), as well as increased blastocyst formation (p < 0.05) after PA and SCNT, as compared to oocytes matured in 108αMEMP and M199. Under conditions of PFF-enriched αMEM, SCNT oocytes matured in 61αMEMF showed higher blastocyst formation (p < 0.05), compared to maturation in 108αMEMF and M199, whereas PA cultured oocytes showed no significant difference. CONCLUSIONS: IVM in αMEM supplemented with reduced NaCl (61.6 mM) enhances the embryonic developmental competence subsequent to PA and SCNT, which attributes toward improved oocyte maturation.
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