WT1遺伝子変異、RS16754バリアント、および急性骨髄性白血病患者の予後因子としてのWT1過剰発現

（1）背景：私たちの研究の目的は、急性骨髄性白血病（AML）における染色体の変化と分子予後マーカーに関連するWT1変異体の複雑な評価とその発現でした。これは、ポーランドのAML患者における最初の多次元研究です。（2）方法：90人のAML患者の骨髄吸引剤を細胞培養（バンディング技術と蛍光in situハイブリダイゼーション）に使用し、DNA（WT1ジェノタイピング、アレイゲノムハイブリダイゼーション）、およびRNA（WT1発現）を分離しました。WT1 RS16754を分析するために、100人の健康な血液ドナーからの末梢血サンプルを使用しました。（3）結果：WT1バリアントRS16754（a; g）の対立遺伝子頻度と分布は、AML患者と対照の間で有意な差はありませんでした。WT1遺伝子のより高い発現は、GAまたはGG遺伝子型と比較して、それぞれ10,556.7対25,836.5コピー（P = 0.01）と比較して、AA遺伝子型（RS16754）で観察されました。WT1変異は、65歳未満のAML患者（p <0.0001）でより頻繁であり、再発のない生存率（RFS）に影響を与えました。NPM1またはCEBPA変異の存在は、WT1変異の存在、オッズ比（OR）= 0.11、95％CI 0.02-0.46、P = 0.05またはOR = 0.05、95％CI 0.006-0.46、P = 0.002のリスクを減少させました。それぞれAML CD34+対CD34-、-20,985対8304（P = 0.039）で有意に高いWT1発現が観察されました。正常および異常な核型の患者間のWT1発現の違いは、統計的に重要ではありませんでした。（4）結論：診断時のWT1遺伝子発現とそのRS16754バリアントはAMLの結果に影響しませんでした。WT1変異は、AMLのRFSに影響を与える可能性があります。

(1) Background: The aim of our study was the complex assessment of WT1 variants and their expression in relation to chromosomal changes and molecular prognostic markers in acute myeloid leukemia (AML). It is the first multidimensional study in Polish AML patients; (2) Methods: Bone marrow aspirates of 90 AML patients were used for cell cultures (banding techniques and fluorescence in situ hybridization), and to isolate DNA (WT1 genotyping, array comparative genomic hybridization), and RNA (WT1 expression). Peripheral blood samples from 100 healthy blood donors were used to analyze WT1 rs16754; (3) Results: Allele frequency and distribution of WT1 variant rs16754 (A;G) did not differ significantly among AML patients and controls. Higher expression of WT1 gene was observed in AA genotype (of rs16754) in comparison with GA or GG genotypes—10,556.7 vs. 25,836.5 copies (p = 0.01), respectively. WT1 mutations were more frequent in AML patients under 65 years of age (p < 0.0001) and affected relapse-free survival (RFS). The presence of NPM1 or CEBPA mutations decreased the risk of WT1 mutation presence, odds ratio (OR) = 0.11, 95% CI 0.02−0.46, p = 0.002 or OR = 0.05, 95% CI 0.006−0.46, p = 0.002, respectively. We observed significantly higher WT1 expression in AML CD34+ vs. CD34−, −20,985 vs. 8304 (p = 0.039), respectively. The difference in WT1 expression between patients with normal and abnormal karyotype was statistically insignificant; (4) Conclusions: WT1 gene expression and its rs16754 variant at diagnosis did not affect AML outcome. WT1 mutation may affect RFS in AML.