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DNA (Mary Ann Liebert, Inc.)1986Dec01Vol.5issue(6)

低濃度のクロラムフェニコールによるプラスミドPBR322およびPBR327の増加の増加

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

プラスミドPBR322およびPBR327の複製と増幅は、リッチ培地(LB)のクロラムフェニコールの低濃度(10-20マイクログラム/mL)によるタンパク質合成の部分的阻害中に最大です。このように、2〜5倍の初期純度(少ないタンパク質および染色体DNA含有量)でのプラスミドDNAの5〜10倍の収率は、標準的な高濃度のクロラムフェニコールを使用するよりも得ることができます。これらの結果は、未分画細菌溶解物のプラスミド定量の改善された方法で得られています。

プラスミドPBR322およびPBR327の複製と増幅は、リッチ培地(LB)のクロラムフェニコールの低濃度(10-20マイクログラム/mL)によるタンパク質合成の部分的阻害中に最大です。このように、2〜5倍の初期純度(少ないタンパク質および染色体DNA含有量)でのプラスミドDNAの5〜10倍の収率は、標準的な高濃度のクロラムフェニコールを使用するよりも得ることができます。これらの結果は、未分画細菌溶解物のプラスミド定量の改善された方法で得られています。

The replication and amplification of plasmids pBR322 and pBR327 is maximal during partial inhibition of protein synthesis by low concentrations (10-20 micrograms/ml) of chloramphenicol in rich medium (LB). In this manner, 5- to 10-fold greater yields of plasmid DNA at 2- to 5-fold greater initial purity (less protein and chromosomal DNA content) can be obtained than by using the standard high concentrations of chloramphenicol. These results have been obtained with an improved method of plasmid quantitation in unfractionated bacterial lysates.

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