タンデム質量分析を使用したジヒドロキシル化ビタミンD3異性体の分化

ビタミンD化合物は、人間の骨の健康を維持するために不可欠なコレステロールに由来するセコステロイドのグループです。最近の研究では、ジヒドロキシル化ビタミンD3化合物1,25-ジヒドロキシビタミンD3および24,25-ジヒドロキシビタミンD3などのビタミンD代謝産物を含むビタミンDのsk骨後の効果が示されています。質量分析によるこれらの異性体の分化と特性評価は、ゼロ質量の違いとそれらの間の軽度の構造の違いにより、困難な場合があります。異性体は通常、質量分析の前に液体クロマトグラフィー（LC）による分離を必要とし、分析に余分な複雑さを加えます。本明細書では、衝突誘導解離（CID）、赤外線多光ソン解離（IRMPD）、電子誘導解離（EID）、および紫外線光学（UVPD）などの断片化方法の使用を調査し、再検討し、12Tフーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴共生腫瘍共同体（UVPD）（UVPD）質量分析計（FT-ICR MS）は、ジヒドロキシル化ビタミンD3異性体の特徴的な断片を生成し、それらを区別するために使用できます。1,25-ジヒドロキシビタミンD3について異性体特異的な断片が観察されました。これは、上記のすべての断片化方法を使用して、24,25-ジヒドロキシビタミンD3 MS/MSスペクトルに明らかに存在していました。1,25-ジヒドロキシビタミンD3化合物のC-6/C-7結合の切断により生成された断片は、断片化中に脆弱なOHグループが保持されていることを示しているため、2つのジヒドロキシル化ビタミンD3異性体の分化を可能にすることを可能にします。以前のクロマトグラフィー分離または誘導体化。

Vitamin D compounds are a group of secosteroids derived from cholesterol that are vital for maintaining bone health in humans. Recent studies have shown extraskeletal effects of vitamin D, involving vitamin D metabolites such as the dihydroxylated vitamin D3 compounds 1,25-dihydroxyvitamin D3 and 24,25-dihydroxyvitamin D3. Differentiation and characterization of these isomers by mass spectrometry can be challenging due to the zero-mass difference and minor structural differences between them. The isomers usually require separation by liquid chromatography (LC) prior to mass spectrometry, which adds extra complexity to the analysis. Herein, we investigated and revisited the use of fragmentation methods such as collisional induced dissociation (CID), infrared multiphoton dissociation (IRMPD), electron induced dissociation (EID), and ultraviolet photodissociation (UVPD), available on a 12T Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometer (FT-ICR MS) to generate characteristic fragments for the dihydroxylated vitamin D3 isomers that can be used to distinguish between them. Isomer-specific fragments were observed for the 1,25-dihydroxyvitamin D3, which were clearly absent in the 24,25-dihydroxyvitamin D3 MS/MS spectra using all fragmentation methods mentioned above. The fragments generated due to cleavage of the C-6/C-7 bond in the 1,25-dihydroxyvitamin D3 compound demonstrate that the fragile OH groups were retained during fragmentation, thus enabling differentiation between the two dihydroxylated vitamin D3 isomers without the need for prior chromatographic separation or derivatization.