エキミジンとそのc-7異性体のエキウム植物性Lからの分離とラット肝細胞に対する肝毒性効果

エキミジンは、多くの国で飼いならされた植物であるEchium Plantagineum L.の主要なピロリジジンアルカロイドです。エキミジンの毒性のため、このアルカロイドは、特に蜂蜜の汚染に関して、ヨーロッパの食品安全局の規制の標的となっています。この研究では、NMR分光法により、亜鉛から精製された主なHPLCピークが、エキミジンに対応するM/Z 398のMS [M + H] +シグナルを使用して植物抽出物を減少させたことを決定しました（1）。（2）。最小量で存在し、Co-Eluting（1）および（2）からHPLCによってかろうじて解決された3番目の異性体は、ヒドロキシミオスコルピン（3）として同定されました。亜鉛の減少の前に、アルカロイド（1）と（2）は、HPLCで単一のピークを形成するN-酸化物の形で主に（90％）存在していました。これは、E。plantagineumのエチフミリンとヒドロキシミオスコルピンの発見の最初の報告です。ニュージーランド、アルゼンチン、米国で収集されたE. Plantagineumのサンプルのレトロ分析により、3つの異性体アルカロイドの同様の共起が確認されました。ラット肝細胞の原発性培養細胞では、3〜300 µg/mLのアルカロイドは、9.26〜14.14 µg/mlの範囲の平均IC50値を伴う肝細胞生存率の濃度依存性阻害を引き起こしました。私たちの発見は、標準的なHPLC酸性条件下で、エキミジンがその異性体、エチフミリン、およびヒドロキシミオスコルピンとの程度の低い程度で、ヒト毒性に影響を与える可能性があることを明らかにしました。

Echimidine is the main pyrrolizidine alkaloid of Echium plantagineum L., a plant domesticated in many countries. Because of echimidine's toxicity, this alkaloid has become a target of the European Food Safety Authority regulations, especially in regard to honey contamination. In this study, we determined by NMR spectroscopy that the main HPLC peak purified from zinc reduced plant extract with an MS [M + H]+ signal at m/z 398 corresponding to echimidine (1), and in fact also represents an isomeric echihumiline (2). A third isomer present in the smallest amount and barely resolved by HPLC from co-eluting (1) and (2) was identified as hydroxymyoscorpine (3). Before the zinc reduction, alkaloids (1) and (2) were present mostly (90%) in the form of an N-oxide, which formed a single peak in HPLC. This is the first report of finding echihumiline and hydroxymyoscorpine in E. plantagineum. Retroanalysis of our samples of E. plantagineum collected in New Zealand, Argentina and the USA confirmed similar co-occurrence of the three isomeric alkaloids. In rat hepatocyte primary culture cells, the alkaloids at 3 to 300 µg/mL caused concentration-dependent inhibition of hepatocyte viability with mean IC50 values ranging from 9.26 to 14.14 µg/mL. Our discovery revealed that under standard HPLC acidic conditions, echimidine co-elutes with its isomers, echihumiline and to a lesser degree with hydroxymyoscorpine, obscuring real alkaloidal composition, which may have implications for human toxicity.