N-ニトロソジメチルアミンによる体液性免疫の抑制における反応性代謝物の役割

ジメチルニトロソアミン（DMN）誘発体液性免疫抑制が反応性中間体によって媒介されるという仮説は、3つのアプローチを使用して雌のB6C3F1マウスでテストされました。第一に、既知の標的臓器（肝臓と腎臓）および免疫臓器（末梢血成分、骨髄細胞、胸腺および脾臓）への反応性種の分布は、6 mg/kgの単一または複数の用量と[メチル-14c] DMNの2マイクロシの後の酸流溶媒放射能を監視することにより実証されました。放射能の大部分は酸に溶解性の材料に存在し、曝露数とともに増加し、免疫グロブリンM抗体形成細胞を列挙することによって決定されるヒツジの赤血球に対するin vivo抗体応答の抑制と相関しました。露出した動物からさまざまな細胞型への脾臓の分別は、マクロファージと比較して、酸加工性放射能とT-およびBリンパ球とのより大きな関連性を示しています。Fractionation of spleen cell lysates into protein, DNA and RNA indicated that most radioactivity was associated with the nucleic acid component.アミノアセトニトリルによるマウスの前処理は、脾臓の1分あたりの酸加工性崩壊を減少させました。2番目のアプローチは、DMNと同じ毒性中間体を形成する化合物の免疫抑制性を実証することでした。脾臓細胞培養にN-ニトロソ（アセトキシメチル）メチルアミンを添加すると、ヒツジの赤血球に対するin vitro抗体応答とミクロモル濃度でのジニトロフェニル化フィコールが完全に抑制されました。3番目のアプローチでは、in vitroで免疫抑制形態にDMNを活性化することが含まれていました。脾細胞のアロクロル誘発マウス肝細胞とのプレインキュベーションは、羊飼育細胞の羊毛細胞に対する抗体形成細胞の反応を著しく抑制できる中間体へのDMNの活性化をもたらしました。

The hypothesis that dimethylnitrosamine (DMN)-induced humoral immune suppression is mediated by reactive intermediates was tested in female B6C3F1 mice using three approaches. First, distribution of reactive species to known target organs (liver and kidney) and to immune organs (peripheral blood components, bone marrow cells, thymus and spleen) was demonstrated by monitoring acid-insoluble radioactivity after single or multiple doses of 6 mg/kg and 2 microCi of [methyl-14C] DMN. Most of the radioactivity resided in acid-insoluble material, which increased with the number of exposures and correlated with suppression of the in vivo antibody response to sheep erythrocytes as determined by enumerating immunoglobulin M antibody-forming cells. Fractionation of spleens from exposed animals into various cell types indicated greater association of acid-insoluble radioactivity with T- and B-lymphocytes as compared to macrophages. Fractionation of spleen cell lysates into protein, DNA and RNA indicated that most radioactivity was associated with the nucleic acid component. Pretreatment of mice with aminoacetonitrile reduced acid-insoluble disintegrations per minute in the spleen. The second approach was to demonstrate the immunosuppressive nature of compounds forming the same toxic intermediate as DMN. The addition of N-nitroso(acetoxymethyl)methylamine to spleen cell cultures resulted in completely suppressed in vitro antibody responses to sheep erythrocytes and dinitrophenylated Ficoll at micromolar concentrations. The third approach involved activating DMN to an immunosuppressive form in vitro. Preincubation of splenocytes with Aroclor-induced mouse hepatocytes resulted in activation of DMN to intermediates capable of markedly suppressing the response of antibody-forming cells to sheep erythrocytes.