非固定および水凍結乾燥したスピロストマム曖昧なSEM観測

私たちは、固定せずに水から得られた繊毛筋骨筋膜を凍結し、走査型電子顕微鏡（SEM）を使用して観察することを目指しました。生細胞を標本スタブに置き、-80°Cまたは-100°Cのいずれかに保管したCUブロックと接触して凍結しました。次に、サンプルを凍結乾燥させ、SEMで観察しました。ほとんどの場合、氷の結晶形成による標本への損傷は観察されませんでした。瞬間的な凍結のため、繊毛の体表面上の繊毛の形質波はよく保存されていました。凍結する直前に機械的振動への避けられない曝露により、約70〜80％の細胞が収縮状態に保存されていました。残りのサンプルは、完全に拡張された状態に保存されていました。細胞表面の形態計測測定により、拡張状態では毛様列が細胞の長軸にほぼ平行であるのに対し、収縮状態では、左利きのヘリックスで45〜65°の角度でねじれていたことが示されました。繊毛列に沿った隣接する繊毛間の距離は、拡張状態で1.88±0.43μm、収縮状態（平均±SD）で1.32±0.41μmでした。ただし、隣接する毛様式の列間の間隔は変更されていませんでした。

We aimed to freeze-dry the ciliate Spirostomum ambiguum, obtained from water, without fixation and observe it using scanning electron microscopy (SEM). Living cells were placed on a specimen stub and frozen upon contact with a Cu block kept at either -80 °C or -100 °C. Samples were then freeze-dried and observed by SEM. In most cases, no damage to the specimen due to ice crystal formation was observed. Because of the instantaneous freezing, the metachronal wave of cilia on the body surface of the ciliate was well preserved. Approximately 70-80% of cells were preserved in the contracted state due to inevitable exposure to mechanical vibration immediately before freezing. The remaining samples were preserved in a fully-extended state. Morphometric measurements of the cell surface showed that in the extended state, ciliary rows were almost parallel to the long axis of the cell, whereas in the contracted state, they were twisted in a left-handed helix at an angle of 45-65°. The distance between adjacent cilia along a ciliary row was 1.88 ± 0.43 μm in the extended state and 1.32 ± 0.41 μm in the contracted state (mean ± SD). However, the spacing between adjacent ciliary rows remained unchanged.