ガストロジンは、活性化されたミクログリアのレニン - アンジオテンシン系を介してノッチ-1シグナル経路を調節します

Notch-1およびレニンアンジオテンシン系（RAS）は、ミクログリアの活性化に関与しています。ガストロジンは、活性化されたミクログリアによって媒介される炎症反応を阻害したことが報告されています。この研究では、この2つの経路間の相互作用の可能性を調査し、ガストロジンがそれらの両方にその影響を及ぼすかどうかを判断しました。さまざまな治療を受けたリポ多糖（LPS）活性化BV-2ミクログリアにおけるRas、Notch-1シグナル伝達、および炎症誘発性メディエーターの発現は、ウエスタンブロットと免疫蛍光によって決定されました。Ras、Notch-1経路、TNF-αおよびIL-1βのタンパク質発現は、活性化ミクログリアで有意に増加しました。外因性ANG IIは、これらのバイオマーカーの発現を著しく強化しました。一方、アジルサルタン[AT1（AT1I）の特定の阻害剤]は、NOTCH-1経路と炎症誘発性サイトカインの発現を阻害しました。Notch-1シグナル伝達がDAPTで阻害された場合、ACEおよびAT1発現は影響を受けず、RASが活性化されたミクログリアでNotch-1経路を調節できるが、相互にではなく調節できることを示しています。さらに、ここでは、ガストロジンがRAS、Notch-1経路、炎症反応を阻害することを示しました。驚くべきことに、GastrodinはAT1IによってRASがブロックされた場合、Notch-1シグナル伝達の発現に影響を与えませんでした。さらに、TNF-αおよびIL-1βの発現は、外因性ANG IIで処理された活性化ミクログリアで有意に増加しました。しかし、この発現はガストロジンによって抑制されました。注目すべきことに、炎症誘発性サイトカインの発現は、ガストロジンおよびAT1I併用治療でさらに減少しました。結果は、LPS誘発ミクログリアのNotch-1シグナル伝達と炎症を調節するRASを介してガストロジンが作用することを示唆しています。

Notch-1 and renin angiotensin system (RAS) are involved in microglia activation. It has been reported that gastrodin inhibited inflammatory responses mediated by activated microglia. This study explored the possible interaction between this two pathways, and to determine whether gastrodin would exert its effects on both of them. Expression of RAS, Notch-1 signaling and proinflammatory mediators in lipopolysaccharide (LPS) activated BV-2 microglia subjected to various treatments was determined by Western blot and immunofluorescence. The protein expression of RAS, Notch-1 pathway and TNF-α and IL-1β was significantly increased in activated microglia. Exogenous Ang II markedly enhanced the expression of these biomarkers. Meanwhile, Azilsartan [a specific inhibitor of AT1 (AT1I)] inhibited the expression of Notch-1 pathway and proinflammatory cytokines. When Notch-1 signaling was inhibited with DAPT, ACE and AT1 expression remained unaffected, indicating that RAS can regulate the Notch-1 pathway in activated microglia but not reciprocally. Additionally, we showed here that gastrodin inhibited the RAS, Notch-1 pathway and inflammatory response. Remarkably, gastrodin did not exert any effect on expression of Notch-1 signaling when RAS was blocked by AT1I, suggesting that gastrodin acts on the RAS directly, not through the Notch-1 pathway. Furthermore, TNF-α and IL-1β expression was significantly increased in activated microglia treated with exogenous Ang II; the expression, however, was suppressed by gastrodin. Of note, expression of proinflammatory cytokines was further decreased in gastrodin and AT1I combination treatment. The results suggest that gastrodin acts via the RAS which regulates the Notch-1 signaling and inflammation in LPS-induced microglia.