慢性リンパ球性白血病のP66SHC欠乏は、NF-κBのROS依存性阻害を通じてケモカイン受容体の発現を促進します

リンパ器官の微小環境は、慢性リンパ球性白血病（CLL）の病因の中心です。その中で、腫瘍細胞は、免疫サーベイルを逃れ、生存促進シグナルを獲得するための好ましいニッチを見つけます。私たちは以前、プロアポトーシスおよび酸化促進剤アダプターP66SHCの発現におけるCLL関連欠陥が、リンパ微小環境における白血病細胞へのホーミングと蓄積の強化につながることを報告しました。CLL細胞における細胞内反応性酸素種（ROS）産生におけるP66SHC欠乏症障害は、リンパ類および非リンファイドオーガンの両方への白血病細胞の宿主を促進するケモカイン受容体CCR2、CXCR3、およびCCR7の発現の強化に因果的に関連しており、示唆しています。ROS変調転写因子の意味。ここでは、転写因子NF-κBのROS応答性P65サブユニットの活性が、H2O2での治療後のNF-κB-ルシフェラーゼレポーターを発現するCLL由来の細胞株MEC-1で妨げられたことを示します。MEC-1細胞では、P66SHCの発現によって細胞内ROSがP66SHCの発現によって生成された場合に生成されたときに同様の結果が得られました。NF-κBの活性化は、ケモカイン受容体CCR2、CXCR3、およびCCR7の発現の増加と関連していました。CLL細胞におけるP66SHCの再構成は、細胞内ROSを正常化し、NF-κBの活性化を妨害し、これらのホーミング受容体の発現が減少しました。我々のデータは、CLL細胞におけるP66SHC欠損関連ROS枯渇がNF-κB過活性化とホーミング受容体の過剰発現に同意し、これらの細胞が生存促進リンパ球ニッチに蓄積する機械的基礎を提供するという直接的な証拠を提供します。

The microenvironment of lymphoid organs is central to the pathogenesis of chronic lymphocytic leukemia (CLL). Within it, tumor cells find a favourable niche to escape immunosurveillance and acquire pro-survival signals. We have previously reported that a CLL-associated defect in the expression of the pro-apoptotic and pro-oxidant adaptor p66Shc leads to enhanced homing to and accumulation of leukemic cells in the lymphoid microenvironment. The p66Shc deficiency-related impairment in intracellular reactive oxygen species (ROS) production in CLL cells is causally associated to the enhanced expression of the chemokine receptors CCR2, CXCR3 and CCR7, that promote leukemic cell homing to both lymphoid and non-lymphoid organs, suggesting the implication of a ROS-modulated transcription factor(s). Here we show that the activity of the ROS-responsive p65 subunit of the transcription factor NF-κB was hampered in the CLL-derived cell line MEC-1 expressing a NF-κB-luciferase reporter following treatment with H2O2. Similar results were obtained when intracellular ROS were generated by expression of p66Shc, but not of a ROS-defective mutant, in MEC-1 cells. NF-κB activation was associated with increased expression of the chemokine receptors CCR2, CXCR3 and CCR7. Reconstitution of p66Shc in CLL cells normalized intracellular ROS and hampered NF-κB activation, which led to a decrease in the expression of these homing receptors. Our data provide direct evidence that the p66Shc-deficiency-related ROS depletion in CLL cells concurs to NF-κB hyperactivation and homing receptor overexpression, providing a mechanistic basis for the enhanced ability of these cells to accumulate in the pro-survival lymphoid niche.