N-ニトロソアミンの発がん性を予測するための細菌逆変異アッセイの使用

ICH M7では、シリコの方法論に続いて専門家のレビューを使用して陽性であると予測される場合、細菌の逆変異アッセイ（つまり、AMESテスト）を使用して不純物が評価されます。N-ニトロソアミン（NAS）は、主にげっ歯類のバイオアッセイにおける非常に強力な変異原性発がん物質になる可能性があるため、医薬品の不純物として最近懸念しています。この分析の目的は、EMESアッセイの感度を決定して、キュレーションの独自のvitic（n = 131）およびLeadScope（n = 70）データベースを使用して発がん結果を予測することでした。NASは、対応するげっ歯類発がん性アッセイがある場合に選択されました。全体として、AMESアッセイの感度/特異性は、それぞれ93-97％と55-86％でした。AMESアッセイの感度は、プレイングの取り込み（84-89％）とプレインキュベーション（82-89％）によって有意に影響を受けませんでした。過敏性は、ラットとハムスターの肝臓誘発S9の使用の使用の間で有意差はありませんでした（80-93％対77-96％）。DMSOを溶媒として使用すると、AMESの感度が高くなります（87-88％）。これらのデータベースの分析に基づいて、OECD 471ガイドラインの下で実施されるAMESアッセイは、NASの発がん性の危険を検出するために非常に敏感です。

Under ICH M7, impurities are assessed using the bacterial reverse mutation assay (i.e., Ames test) when predicted positive using in silico methodologies followed by expert review. N-Nitrosamines (NAs) have been of recent concern as impurities in pharmaceuticals, mainly because of their potential to be highly potent mutagenic carcinogens in rodent bioassays. The purpose of this analysis was to determine the sensitivity of the Ames assay to predict the carcinogenic outcome with curated proprietary Vitic (n = 131) and Leadscope (n = 70) databases. NAs were selected if they had corresponding rodent carcinogenicity assays. Overall, the sensitivity/specificity of the Ames assay was 93-97% and 55-86%, respectively. The sensitivity of the Ames assay was not significantly impacted by plate incorporation (84-89%) versus preincubation (82-89%). Sensitivity was not significantly different between use of rat and hamster liver induced S9 (80-93% versus 77-96%). The sensitivity of the Ames is high when using DMSO as a solvent (87-88%). Based on the analysis of these databases, the Ames assay conducted under OECD 471 guidelines is highly sensitive for detecting the carcinogenic hazards of NAs.