シクロフィリンAは、RUNX2を調節することにより、骨芽細胞の分化を促進します

シクロフィリンA（CYPA）は、タンパク質の折り畳みと人身売買を調節することによりさまざまな生物学的活性に関与するペプチジルプロリルCIS-TRANSイソメラーゼ活性を備えた、ユビキタスで発現し、高度に保存されたタンパク質です。CYPAは骨芽細胞の分化を積極的に調節することが報告されていますが、機構の詳細はほとんど不明のままです。この研究では、骨芽細胞分化のCYPAを介した調節のメカニズムを解明することを目的としました。CYPAの過剰発現は、骨形成タンパク質4（BMP4）処理されたC2C12細胞の骨芽細胞分化を促進し、CYPAのノックダウンはBMP4処理C2C12の骨芽細胞分化を阻害しました。CYPAとRUNX2は、免疫沈降実験に基づいて相互作用することが示され、CYPAは用量依存的にRUNX2転写活性を増加させました。我々の結果は、これがCYPAがRUNX2のDNA結合親和性をRUNX2結合部位に増加させる可能性があるためである可能性があることを示しています。さらに、骨芽細胞分化、さまざまなキナーゼ阻害剤の調節におけるCYPAの上流の因子を特定するために、CYPAの上流因子を特定できるためです。骨芽細胞の分化に影響を与えることが知られていることが知られています。骨形成中に適用されました。AKT阻害は、CYPAを過剰発現するBMP4誘発C2C12細胞における骨形成の最も有意な抑制をもたらしました。まとめると、我々の結果は、CYPAがRUNX2のDNA結合親和性を高めることにより骨芽細胞の分化を積極的に調節し、AKTシグナル伝達がCYPAの上流であることを示しています。

Cyclophilin A (CypA) is a ubiquitously expressed and highly conserved protein with peptidyl-prolyl cis-trans isomerase activity that is involved in various biological activities by regulating protein folding and trafficking. Although CypA has been reported to positively regulate osteoblast differentiation, the mechanistic details remain largely unknown. In this study, we aimed to elucidate the mechanism of CypA-mediated regulation of osteoblast differentiation. Overexpression of CypA promoted osteoblast differentiation in bone morphogenic protein 4 (BMP4)-treated C2C12 cells, while knockdown of CypA inhibited osteoblast differentiation in BMP4-treated C2C12. CypA and Runx2 were shown to interact based on immunoprecipitation experiments and CypA increased Runx2 transcriptional activity in a dose-dependent manner. Our results indicate that this may be because CypA can increase the DNA binding affinity of Runx2 to Runx2 binding sites such as osteoblast-specific cis-acting element 2. Furthermore, to identify factors upstream of CypA in the regulation of osteoblast differentiation, various kinase inhibitors known to affect osteoblast differentiation were applied during osteogenesis. Akt inhibition resulted in the most significant suppression of osteogenesis in BMP4-induced C2C12 cells overexpressing CypA. Taken together, our results show that CypA positively regulates osteoblast differentiation by increasing the DNA binding affinity of Runx2, and Akt signaling is upstream of CypA.