ノコダゾールまたはコルヒチンにさらされたマウス腸の臓器培養における微小管の喪失と糖タンパク質の移動の変化

マウス空腸からの外植片は、コルヒチン（100マイクログラム/ml）またはノコダゾール（10マイクログラム/ml）の存在下（コントロール）または存在下で3〜7時間培養しました。回復実験では、外植片を新鮮な培地で追加期間培養しました。糖タンパク質のラベルを付けるために、初期培養または回収期間の最後の3時間または6時間に3Hフコースを加えました。細胞内分別研究により、コルヒチンとノコダゾールは、ブラシ境界（P2）への標識糖タンパク質の移動を40-45％阻害したことが明らかになりました。吸収細胞の放射線学的研究は、コルヒチンとノコダゾールが微生物境界境界の標識を67％および87％阻害する一方で、基底外側原形質膜の標識が114％および275％増加したことを示した。免疫細胞化学的研究により、コルヒチンとノコダゾールの両方が吸収細胞内の微小管ネットワークの仮想消失を引き起こしたことが明らかになりました。通常、微生物の境界に向けて運命づけられている一部の糖タンパク質が基底外側膜に再ルーティングされる可能性があります。薬物処理後に観察された微小管の損失は、微小管が膜糖タンパク質の細胞内移動に役割を果たす可能性があることを示唆しています。この概念に対する追加のサポートは、回復実験では、微小管ネットワークが再確立された後に制御値に返されたラベルの分布が制御値に戻されたという事実によって提供されます。

Explants from mouse jejunum were cultured for 3-7 h in the absence (control) or presence of colchicine (100 micrograms/ml) or nocodazole (10 micrograms/ml). In recovery experiments, explants were cultured in fresh medium for an additional period. To label glycoproteins, 3H-fucose was added during the last 3 or 6 h of the initial culture or recovery period. Subcellular fractionation studies revealed that colchicine and nocodazole inhibited migration of labelled glycoproteins to the brush border (P2) by 40-45%. Radioautographic studies of absorptive cells showed that colchicine and nocodazole inhibited labelling of the microvillous border by 67% and 87%, while labelling of the basolateral plasma membrane increased by 114% and 275%. Immunocytochemical studies revealed that both colchicine and nocodazole caused the virtual disappearance of the microtubular network in the absorptive cells. It is possible that some glycoproteins normally destined for the microvillous border are rerouted to the basolateral membrane. The observed loss of microtubules after drug treatment suggests that microtubules may play a role in the intracellular migration of membrane glycoproteins. Additional support for this concept is provided by the fact that in recovery experiments the distribution of label returned to control values after the microtubular network became re-established.