RPMI-1640培地は、NNN培地を欠く皮膚リーシュマニア症の診断と分離に使用できますか？

リーシュマニア症の臨床検査診断は、培養、顕微鏡検査、血清学的および分子法に基づいています。ゴールドスタンダード法は、顕微鏡検査でアマスティゴーテを見ることであり、ノヴィー、マクニール、ニコル（NNN）培地でプロマスチゴットを栽培することです。NNN媒体は、世界中の文化に頻繁に使用されます。私たちの研究では、RPMI-1640培地の使用が、皮膚リーシュマニア症（CL）の診断にゴールドスタンダードNNN培地が利用できない場合に適切な方法であるかどうかを調査することを目的としていました。塗抹標本は、マニサセラル大学医学部に適用され、CLを疑っている病変を持っていた患者から針吸引液サンプルから調製され、アマスティゴーテの存在のためにジムサで染色されました。採取したサンプルは、RPMI-1640スープに直接接種され、約束のために26°Cでインキュベートされました。インキュベーション後の連続日に、Promastigoteの成長が確認されました。成長した分離株のジェノタイピングは、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応の助けを借りて、内部転写Spacer-1（ITS-1）遺伝子領域に固有のプライマーとプローブで実行されました。アマスチゴーテ型は、患者から取った針吸引液サンプル塗抹標本の顕微鏡検査で観察されました。一方、3日目のRPMI-1640スープでは、プロマスチコートの成長が観察されました。さらに、CL患者から得られた分離株は、ジェノタイピングによる種の決定の結果として、リーシュマニアトロピカであると判断されました。この研究は、ゴールドスタンダードNNN媒体に簡単にアクセスできる研究所でのリーシュマニア症の診断のための代替媒体を示唆するという点で重要であると考えられています。RPMI-1640培地は、寄生虫学研究所で簡単に入手して調製され、疾患と治療の追跡調査の診断に役立ちます。Leishmaniaspp。分離および薬剤耐性研究。

Laboratory diagnosis of leishmaniasis is based on culture, microscopic examination, serological and molecular methods. The gold standard method is to see amastigotes in microscopic examination and to grow promastigotes in Novy, MacNeal, Nicolle (NNN) medium. NNN medium is frequently used for culture all over the world. In our study, it was aimed to investigate whether the use of RPMI-1640 medium is an appropriate method in cases where the gold standard NNN medium is not available for the diagnosis of cutaneous leishmaniasis (CL). Smears were prepared from the needle aspiration fluid sample from the patient who applied to Manisa Celal Bayar University Faculty of Medicine and had lesions suspicious of CL, and were stained with Giemsa for the presence of amastigotes. The samples taken were directly inoculated into RPMI-1640 broth and incubated at 26 °C for the presence of promastigotes. On consecutive days after incubation, it was checked for promastigote growth. Genotyping of the grown isolate was performed with primers and probes specific to the internal transcribed spacer-1 (ITS-1) gene region with the help of real-time polymerase chain reaction. The amastigote form was observed in the microscopic examination of the needle aspiration fluid sample smear preparations taken from the patient. On the other hand, promastigote growth was observed in RPMI-1640 broth from the 3rd day. In addition, the isolate obtained from the CL patient was determined to be Leishmania tropica as a result of the species determination made by genotyping. It is thought that this study is important in terms of suggesting an alternative medium for the diagnosis of leishmaniasis in laboratories where the gold standard NNN medium is easily accessible. RPMI-1640 medium, which is easily obtained and prepared in parasitology laboratories, can help in the diagnosis of the disease and treatment follow-up, Leishmania spp. isolation and drug resistance studies.