NG108-15細胞における「迅速な発症」神経突起形成の運動分析は、基底結合ラミニンの二重の役割を明らかにしています

最小限の血清を含まない培地中のラミニンコーティングされたポリリジン処理プラスチックペトリ皿にメッキされた未分化の神経ハイブリッドNG108-15細胞は、播種後1〜4時間以内に長い神経突起を形成しました。これらの「迅速な発症」神経突起の形態学的特徴と薬理学的反応は、ニューロン成長コーンのものと著しく類似していた。シクロヘキシミド（1-10マイクログラム/mL）とフォルスコリン（10（-7）から10（-6）m）は、ラミニン刺激ニューリスの初期形成を加速しましたが、ポリリジンでコーティングされたペトリ皿に迅速な発症神経突起が出現することはありませんでした一人で。シクロヘキシミドの基骨依存性効果の定量的研究は、ラミニン刺激ベースライン速度の大きさとは無関係に、最大限に有効な量のラミニンでさえ添加剤であり、神経突起が形成される速度の固有の天井によって制限されないことを示しました。メチル化阻害剤5'-デオキシ-5'-メチルチオアデノシン（MTA）（3 x 10（-4）から3 x 10（-3）m）は、神経岩を刺激してポリリシンに形成しました。MTAおよびラミニン刺激神経突起は、カルモジュリン拮抗薬およびホルボルエステル12-O-テトラデカノイルフォルボール-13-アセテート（TPA）に対する感受性が類似していた。しかし、MTA刺激神経突起の形成は、シクロヘキシミドによって加速されませんでした。「迅速な発症」神経突起形成の単純な2コンパートメント運動モデルが提案されています。コンパートメントAは、ラミニンとMTA刺激の両方の神経突起に共通しています。コンパートメントBはシクロヘキシミドの影響を受け、コンパートメントAに含まれる神経突起形成機構へのアクセスは、基底の性質に応じてゲートされています。その直接的な効果に加えて、ラミニンは、内因的に活性コンパートメントBに作用する他の信号の有効性を調節することにより、2つの運動コンパートメントの相対的な支配を制御します。

Undifferentiated neural hybrid NG108-15 cells plated on laminin-coated, polylysine-treated plastic Petri dishes in minimal serum-free media formed long neurites within 1-4 h post-plating. Morphologic features and pharmacologic responses of these 'rapid onset' neurites were strikingly similar to those of neuronal growth cones. Cycloheximide (1-10 micrograms/ml) and forskolin (10(-7) to 10(-6) M) accelerated the initial formation of laminin-stimulated neurites, but did not cause rapid onset neurites to emerge upon Petri dishes coated with polylysine alone. Quantitative study of the substratum-dependent effect of cycloheximide showed that it was additive even with maximally effective amounts of laminin, independent of the magnitude of the laminin-stimulated baseline rate and not limited by an inherent ceiling in the rate at which neurites could form. The methylation inhibitor 5'-deoxy-5'-methyl thioadenosine (MTA) (3 X 10(-4) to 3 X 10(-3) M) did stimulate neurites to form on polylysine. MTA- and laminin-stimulated neurites were similar in their susceptibility to calmodulin antagonists and the phorbol ester 12-O-tetradecanoyl phorbol-13-acetate (TPA). However, formation of MTA-stimulated neurites was not accelerated by cycloheximide. A simple two-compartment kinetic model of 'rapid onset' neurite formation is proposed: compartment A is common to both laminin- and MTA-stimulated neurites. Compartment B is affected by cycloheximide, and its access to the neurite formation machinery contained in compartment A is gated according to the nature of the substratum. In addition to its direct effects, laminin controls the relative dominance of the two kinetic compartments via modulating the effectiveness of other signals acting upon an endogenously active compartment B.