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Biopreservation and biobanking2023Oct01Vol.21issue(5)

アーカイブの貯蔵後のタンパク質とRNAの品質評価ファルマリン固定パラフィン包埋されたヒト乳がん組織マイクロアレイセクション

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

ホルマリン固定パラフィン包埋組織切片の免疫原性は、貯蔵と輸送中に減少する可能性がありますが、抗原損失の正確なメカニズムとそれを防ぐ方法は明らかではありません。ここでは、ヒト乳房組織マイクロアレイ(TMA)組織におけるエストロゲン受容体(ER)、プロゲステロン受容体(PR)、ヒト表皮成長因子受容体2(HER-2)、E-カドヘリン、KI-67の発現の変化を調査しました。乾燥状態と湿った状態で最大3か月間保存されているセクション。ERとPRの発現の正の速度は、3か月の貯蔵後に最小限に変化しましたが、湿度の高い条件で保存されたERとPRのALLREDスコアは、新鮮な組織と比較して著しく減少しました。乾燥状態で保存された乳房TMAセクションのHER-2抗原性とRNAの完全性は、貯蔵時間とともに徐々に減少しましたが、湿度の高い条件でのHER-2の免疫反応性とRNAの品質は、貯蔵の長さが増加するにつれて急激に減少しました。乾燥状態で保存された組織切片におけるE-カドヘリン染色の面積と強度は、それぞれ3か月後に最小限に変化しませんでした。対照的に、湿度のある条件で保存された組織切片におけるE-カドヘリン染色の面積と強度は、貯蔵の長さが増加するにつれて大幅に減少しました。最後に、3か月間乾燥(9%減少)および湿潤(31.9%減少)条件で保存された組織切片のKI-67標識指数が、新鮮な切片と比較して減少しました。結論として、これらの結果は、水が保存された組織切片のタンパク質とRNA分解の重要な要因であることを示しており、診療所では詳細なガイドラインが必要であることを示しています。

ホルマリン固定パラフィン包埋組織切片の免疫原性は、貯蔵と輸送中に減少する可能性がありますが、抗原損失の正確なメカニズムとそれを防ぐ方法は明らかではありません。ここでは、ヒト乳房組織マイクロアレイ(TMA)組織におけるエストロゲン受容体(ER)、プロゲステロン受容体(PR)、ヒト表皮成長因子受容体2(HER-2)、E-カドヘリン、KI-67の発現の変化を調査しました。乾燥状態と湿った状態で最大3か月間保存されているセクション。ERとPRの発現の正の速度は、3か月の貯蔵後に最小限に変化しましたが、湿度の高い条件で保存されたERとPRのALLREDスコアは、新鮮な組織と比較して著しく減少しました。乾燥状態で保存された乳房TMAセクションのHER-2抗原性とRNAの完全性は、貯蔵時間とともに徐々に減少しましたが、湿度の高い条件でのHER-2の免疫反応性とRNAの品質は、貯蔵の長さが増加するにつれて急激に減少しました。乾燥状態で保存された組織切片におけるE-カドヘリン染色の面積と強度は、それぞれ3か月後に最小限に変化しませんでした。対照的に、湿度のある条件で保存された組織切片におけるE-カドヘリン染色の面積と強度は、貯蔵の長さが増加するにつれて大幅に減少しました。最後に、3か月間乾燥(9%減少)および湿潤(31.9%減少)条件で保存された組織切片のKI-67標識指数が、新鮮な切片と比較して減少しました。結論として、これらの結果は、水が保存された組織切片のタンパク質とRNA分解の重要な要因であることを示しており、診療所では詳細なガイドラインが必要であることを示しています。

Although the immunogenicity of formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections can decrease during storage and transport, the exact mechanism of antigenic loss and how to prevent it are not clear. Herein, we investigated changes in the expression of estrogen receptor (ER), progesterone receptor (PR), human epidermal growth factor receptor 2 (HER-2), E-cadherin, and Ki-67 in human breast tissue microarray (TMA) tissue sections stored for up to 3 months in dry and wet conditions. The positive rates of ER and PR expression were minimally changed after 3 months of storage, but the Allred scores of ER and PR stored in humid conditions decreased remarkably in comparison to fresh-cut tissue. The HER-2 antigenicity and RNA integrity of breast TMA sections stored in dry conditions diminished gradually with storage time, whereas the immunoreactivity and RNA quality of HER-2 in humid conditions decreased sharply as storage length increased. The area and intensity of E-cadherin staining in tissue sections stored in dry conditions did not change significantly and were minimally changed after 3 months, respectively. In contrast, the area and intensity of E-cadherin staining in tissue sections stored in humid conditions decreased significantly as storage length increased. Finally, the Ki-67 labeling index of tissue sections stored for 3 months in dry (9% decrease) and wet (31.9% decrease) conditions was decreased in comparison to fresh sections. In conclusion, these results indicate that water is a crucial factor for protein and RNA degradation in stored tissue sections, and detailed guidelines are required in the clinic.

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