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Journal of chromatography. A2022Dec06Vol.1685issue()

エピタコフォレシスによるバイオ流体からの分化タンパク質濃度

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

複雑な生物学的マトリックスのタンパク質分析に対する需要の増加に伴い、新しいサンプル調製技術の開発に対する主張が高まっています。最近、DNAサンプルの検定濃度と洗浄のための新しい変位電気泳動技術(エピタコフォレーゼ)と計装を導入しました。この作業では、このデバイスをタンパク質サンプルに適用する可能性について説明しています。陽イオンモードでタンパク質のエピタコフォアティック濃度のための方法を開発し、複雑な生物学的マトリックス(尿および成長培地)からタンパク質ゾーンを濃縮して収集することにより、それをテストしました。最適化された条件下では、最大99%の回収率が得られました。さらに、開発された方法の適用性は、細胞アポトーシス中にタンパク質シトクロムCが放出されたHeLa細胞株成長培地からシトクロムCゾーンを集中および収集することによって証明されました。

複雑な生物学的マトリックスのタンパク質分析に対する需要の増加に伴い、新しいサンプル調製技術の開発に対する主張が高まっています。最近、DNAサンプルの検定濃度と洗浄のための新しい変位電気泳動技術(エピタコフォレーゼ)と計装を導入しました。この作業では、このデバイスをタンパク質サンプルに適用する可能性について説明しています。陽イオンモードでタンパク質のエピタコフォアティック濃度のための方法を開発し、複雑な生物学的マトリックス(尿および成長培地)からタンパク質ゾーンを濃縮して収集することにより、それをテストしました。最適化された条件下では、最大99%の回収率が得られました。さらに、開発された方法の適用性は、細胞アポトーシス中にタンパク質シトクロムCが放出されたHeLa細胞株成長培地からシトクロムCゾーンを集中および収集することによって証明されました。

With increasing demands on protein analyses in complex biological matrices, the insistence on developing new sample preparation techniques is rising. Recently, we introduced a new displacement electrophoresis technique (epitachophoresis) and instrumentation for preparative concentration and cleaning of DNA samples. This work describes the possibility of applying this device to protein samples. We have developed a method for the epitachophoretic concentration of proteins in a cationic mode and tested it by concentrating and collecting the protein zones from complex biological matrices (urine and growth medium). Under optimized conditions, we have obtained recoveries up to 99%. Furthermore, the applicability of the developed method was proven by concentrating and collecting the cytochrome c zone from a HeLa cell line growth medium, where the protein cytochrome c was released during cell apoptosis.

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