ニューロンとグリアのタンパク質代謝回転を決定するダイナミックシラック

細胞タンパク質の代謝回転 - タンパク質合成と分解の正味の結果は、定常状態の下でタンパク質の恒常性と細胞機能を維持し、細胞が摂動時にプロテオームを改造できるようにするために重要です。脳細胞では、タンパク質は、細胞型、細胞内局在、細胞環境、ニューロン活性などのさまざまな要因に応じて、異なる速度で継続的に引き渡されます。ここでは、動的/パルスシラックと質量分析を使用した一次培養ラットニューロンとグリアのタンパク質合成、分解、および離職の分析のためのワークフローについて説明します。

Cellular protein turnover-the net result of protein synthesis and degradation-is crucial to maintain protein homeostasis and cellular function under steady-state conditions and to enable cells to remodel their proteomes upon a perturbation. In brain cells, proteins are continuously turned over at different rates depending on various factors including cell type, subcellular localization, cellular environment, and neuronal activity. Here we describe a workflow for the analysis of protein synthesis, degradation, and turnover in primary cultured rat neurons and glia using dynamic/pulsed SILAC and mass spectrometry.