CFTRは、マウスセルトリ細胞におけるアクアポリンを介したグリセロール透過性を調節します

嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンスレギュレーター（CFTR）は、男性の生殖路全体の液体ホメオダイナミクスにとって重要な陰イオンチャネルです。以前の証拠は、このチャネルとアクアポリン（AQPS）の間の潜在的な分子パートナーシップに光を当てていました。ここでは、マウスセルトリ細胞（MSC）におけるAQPSを介したグリセロール透過性に対するCFTRの役割を調査します。RT-PCR、ウエスタンブロット、および免疫蛍光法により、MSCにおけるCFTR、AQP3、AQP7、およびAQP9の発現を特定することができました。次に、細胞を特定のCFTR阻害剤であるCFTRINH-172で処理し、そのグリセロール透過性は停止流の光散乱によって評価されました。CFTR阻害は、対照群と比較した場合、MSCのグリセロール透過性を30.6％減少させることが観察されました。Duolink近接結紮アッセイを使用して、CFTRと同定したさまざまなアクアグリセロポリンとの間の内因性タンパク質間相互作用を評価しました。CFTRはAQP3、AQP7、およびAQP9に近接しており、可能性のある物理的相互作用により、CFTRがMSCのAQPを介したグリセロール透過性を調節できることを肯定的に検出しました。グリセロールは血液テスティスバリアの制御と精巣の濃度の上昇に不可欠であるため、精子形成の破壊が生じるため、CFTRの誤動作とグリセロール透過性の結果としての変化は、男性の不妊と嚢胞性線維の間の潜在的なリンクであることを示唆しています。

The cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) is an anion channel that is crucial for fluid homeodynamics throughout the male reproductive tract. Previous evidence shed light on a potential molecular partnership between this channel and aquaporins (AQPs). Herein, we explore the role of CFTR on AQPs-mediated glycerol permeability in mouse Sertoli cells (mSCs). We were able to identify the expression of CFTR, AQP3, AQP7, and AQP9 in mSCs by RT-PCR, Western blot, and immunofluorescence techniques. Cells were then treated with CFTRinh-172, a specific CFTR inhibitor, and its glycerol permeability was evaluated by stopped-flow light scattering. We observed that CFTR inhibition decreased glycerol permeability in mSCs by 30.6% when compared to the control group. A DUOLINK proximity ligation assay was used to evaluate the endogenous protein-protein interactions between CFTR and the various aquaglyceroporins we identified. We positively detected that CFTR is in close proximity with AQP3, AQP7, and AQP9 and that, through a possible physical interaction, CFTR can modulate AQP-mediated glycerol permeability in mSCs. As glycerol is essential for the control of the blood-testis barrier and elevated concentration in testis results in the disruption of spermatogenesis, we suggest that the malfunction of CFTR and the consequent alteration in glycerol permeability is a potential link between male infertility and cystic fibrosis.