凍結前および凍結融解したイノシシの精液の精子品質に対する天然蜂蜜の凍結保護剤効果

天然蜂蜜は、その有益な特性のために哺乳類の配偶子の保存に成功裏に使用されています。この研究の目的は、凍結する前にイノシシの精液の品質を改善するためのエクステンダーの蜂蜜の包含レベルを決定し、凍結したイノシシのセマーンサンプルの融解後の品質に対するエクステンダーおよび凍結培地への蜂蜜包含の影響を調査することでした。2つの実験のために、手袋をはめたハンドテクニックを使用して、末端に交配された6つのイノシシからの射精が収集されました。実験1はランダム化ブロック設計であり、イノシシの精液エクステンダー[コントロール（0H）-Androhep PlusまたはAndrohep Plusの4つの包含レベルの蜂蜜を0.25％、0.50％、および0.75％の蜂蜜（0.25H、0.50H、および0.75H）に評価します。それぞれ）]。射精をプールし、治療に従ってアリコートし、17ºCで24時間冷却しました。この実験の結果は、EXPの包含レベルを決定するために使用されました。2。実験2は2 x×3の要因設計であり、イノシシの精液エクステンダーと凍結培地に蜂蜜を含めることを評価しました。個々のイノシシの精液サンプルは、蜂蜜の有無にかかわらずエクステンダーで冷却されました（C0：Androhep Plus; C1：Androhep Plus + 0.25％蜂蜜）。24時間後、精液サンプルを評価し、乳糖卵卵黄（LEY）培地で希釈し、3つの凍結媒体タイプの1つを希釈しました。F0：93％ley + 6％グリセロール + 1％equex-stmペースト（ESP）;F1：93％Ley +（3％グリセロールと3％蜂蜜） + 1％ESP;F2：93％Ley + 6％グリセロール +（0.5％ESPおよび0.5％蜂蜜）。サンプルを制御されたレートフリーザーを使用して0.5 mLストローで凍結し、液体窒素に保存しました。exp。1、0.25Hおよび0.50Hは、冷却されたイノシシの運動性（P = 0.033）および進行性運動性（P = 0.001）の改善されました。それにもかかわらず、EXPのために0.25Hが選択されました。2。Exp。2、C0F2では、融解後の運動性と進行性運動性が最も高かった（P <0.05）が、C1F2と違いはありませんでした。形態学的に正常な細胞と先頭は、蜂蜜のすべての包含レベルで高かった（P <0.05）。結論として、Androhep Plusに蜂蜜を0.25％および0.50％含めることで、24時間後に冷却されたイノシシサンプルの運動性と進行性の運動性が向上します。Androhep Plusを0.25％の蜂蜜で補充すると、より高い正常な精子細胞と凍結保存されたイノシシ精液の先体が維持されます。凍結媒体中の50％のEquex-STMペーストを蜂蜜に置き換えると、融解後の精子の運動性、進行性の運動性、正常な精子の割合、および凍結保存されたイノシシの先頭の先体が改善されます。

Natural honey has been successfully used in the preservation of mammalian gametes because of its beneficial properties. The objectives of this study were to determine the inclusion level of honey in extender for improving boar semen quality before freezing and to investigate the effects of honey inclusion in extender and freezing media on post-thaw quality of frozen-thawed boar semen samples. Ejaculates from six terminally crossbred boars were collected using the gloved-hand technique for two experiments. Experiment 1 was a randomized block design, evaluating four inclusion levels of honey in boar semen extender [Control (0H)-Androhep Plus or Androhep Plus with 0.25%, 0.50%, and 0.75% honey (0.25H, 0.50H, and 0.75H respectively)]. Ejaculates were pooled, aliquoted according to treatments, and cooled for 24 h at 17 ºC. The results of this experiment were used to determine inclusion levels in exp. 2. Experiment 2 was a 2 x ×3 factorial design, evaluating the inclusion of honey in boar semen extender and freezing media. Semen samples from individual boars were cooled in extender with or without honey (C0: Androhep Plus; C1: Androhep Plus + 0.25% honey). After 24 h, semen samples were evaluated, diluted in lactose-egg yolk (LEY) media, and one of three freezing media types; F0: 93% LEY + 6% glycerol + 1% Equex-STM Paste (ESP); F1: 93% LEY + (3% glycerol and 3% honey) + 1% ESP; and F2: 93% LEY + 6% glycerol + (0.5% ESP and 0.5% honey). Samples were frozen in 0.5 mL straws using a controlled-rate freezer and stored in liquid nitrogen. In exp. 1, 0.25H and 0.50H improved motility (P = 0.033) and progressive motility (P = 0.001) of cooled boar semen. Nevertheless, 0.25H was selected for exp. 2. In exp. 2, post-thaw motility and progressive motility were highest (P < 0.05) in C0F2 but not different from C1F2. Morphologically normal cells and acrosomes were higher with all inclusion levels of honey (P < 0.05). In conclusion, 0.25% and 0.50% inclusion of honey in Androhep Plus improves motility and progressive motility of cooled boar semen samples after 24 h. Supplementing Androhep Plus with 0.25% honey maintains higher normal sperm cells and acrosomes of cryopreserved boar semen. Replacing 50% Equex-STM paste with honey in freezing media improves post-thaw sperm motility, progressive motility, percentage of normal sperm, and acrosome of cryopreserved boar semen.