ショウジョウバエMelanogaster ATTP40ドッキングサイトと誘導体は、MSP-300の挿入変異です

ɸC31インテグレーゼシステムは、ショウジョウバエのメラノガスターで広く使用されており、特定の遺伝子座への導入遺伝子標的を可能にします。長年にわたり、100を超えるATTPドッキングサイトのいずれかを搭載したハエが構築されています。ATTP40と呼ばれる人気のあるドッキングサイトの1つは、Nesprin-1オーソログMSP-300の近くにあり、特定のMSP-300アイソフォームの上流と他の最初のイントロン内にあります。ここでは、ATTP40が幼虫の筋肉核クラスタリングを引き起こすことを示します。これは、MSP-300変異によっても付与される表現型です。また、ATTP40内のハエのベアリング挿入が、3番目の幼虫でMSP-300転写レベルの低下を示すことができることを示しています。最後に、ATTP40への特定の「トランスジェニックRNAiプロジェクト」（トリップ）挿入を運ぶ染色体は、特定の遺伝的背景にpupまたは成体の不妊症または不妊症、または支配的な核クラスタリング効果を付与することができます。これらの表現型は、ATTP40内の挿入からの転写を必要としません。これらの結果は、ATTP40および挿入誘導体がMSP-300挿入変異として作用することを示しています。これらの発見は、ATTP40を含むハエのデータを解釈する際に考慮する必要があります。

The ɸC31 integrase system is widely used in Drosophila melanogaster to allow transgene targeting to specific loci. Over the years, flies bearing any of more than 100 attP docking sites have been constructed. One popular docking site, termed attP40, is located close to the Nesprin-1 orthologue msp-300 and lies upstream of certain msp-300 isoforms and within the first intron of others. Here we show that attP40 causes larval muscle nuclear clustering, which is a phenotype also conferred by msp-300 mutations. We also show that flies bearing insertions within attP40 can exhibit decreased msp-300 transcript levels in third instar larvae. Finally, chromosomes carrying certain "transgenic RNAi project" (TRiP) insertions into attP40 can confer pupal or adult inviability or infertility, or dominant nuclear clustering effects in certain genetic backgrounds. These phenotypes do not require transcription from the insertions within attP40. These results demonstrate that attP40 and insertion derivatives act as msp-300 insertional mutations. These findings should be considered when interpreting data from attP40-bearing flies.