前立腺2（Stamp2）の6輸血タンパク質の過剰発現は、おそらくNF-κB経路を介したM1マクロファージ偏光を妨げることにより、敗血症誘発性急性肺損傷を緩和します。

はじめに：急性肺損傷（ALI）は、敗血症患者の主な死因です。前立腺2（Stamp2）の6型膜貫通タンパク質は炎症の重要な調節因子であり、敗血症性ALIでの役割は不明のままです。 材料と方法：雄のC57BL/6マウスを盲腸結合穿刺（CLP）に服従させて実験的敗血症を誘導したが、リポポリ糖（LPS）を刺激する生の264.7細胞は、それぞれin vivoおよびin vitroで敗血性ALIのモデルとして使用した。マウス肺およびRAW264.7細胞におけるStamp2の過剰発現は、アデノウイルスベクターで行われました。肺損傷の程度を評価するために、組織肺損傷、肺湿/乾燥体重（w/d）比、および肺ミエロペルオキシダーゼ（MPO）活性を測定しました。気管支肺胞洗浄液（BALF）の細胞数は、Giemsa染色を使用して測定されました。炎症因子の濃度は、酵素結合免疫吸着アッセイによって検出されました。マクロファージの偏光は、誘導性一酸化窒素シンターゼ（INOS）およびF4/80染色によって評価されました。細胞アポトーシスとNF-κB経路の活性化は、ウエスタンブロット、TUNEL染色、免疫蛍光、および免疫組織化学を使用して評価されました。 結果：Stamp2の過剰発現は、肺のw/d比が減少し、肺組織のMPO活性が減少したマウスのCLP誘発肺損傷を緩和しました。Stamp2の過剰発現は、炎症細胞の肺浸潤、およびBALFのTNF-A、IL-6、およびマクロファージ化学誘引物質タンパク質-1（MCP-1）のレベルを減少させました。過剰発現Stamp2は、F4/80および肺組織のINOS染色によって示されるように、肺組織のマクロファージM1偏光を阻害しました。Stamp2の過剰発現は、Bcl-2を増加させ、Baxおよび切断カスパーゼ3発現を減少させることにより、生の264.7細胞アポトーシスを阻害しました。さらに、Stamp2の過剰発現は、IκBαのリン酸化の減少、およびNF-κBP65のリン酸化と転座によって証明されるように、核因子κB（NF-κB）P65経路の活性化を抑制しました。in vitroの研究では、Stamp2の過剰発現がマクロファージのNF-κB経路（IκBα/P65）を抑制し、マクロファージM1偏光およびM1関連炎症因子産生（TNF-A、IL-6、およびMCP-1）を減少させることがさらに証明されました。 結論：我々の研究は、NF-κBシグナル伝達活性化を抑制することによりマクロファージM1偏光を阻害することにより、Stamp2が敗血症誘発ALIの炎症を軽減できる可能性があることを初めて実証しました。

INTRODUCTION: Acute lung injury (ALI) is a major cause of death in sepsis patients. The Six-transmembrane protein of prostate 2 (STAMP2) is a key regulator of inflammation, while its role in septic ALI remains unclear. MATERIAL AND METHODS: Male C57BL/6 mice were subjected to cecal ligation puncture (CLP) to induce experimental sepsis whereas lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW 264.7 cells were used as the models of septic ALI in vivo and in vitro, respectively. Overexpression of STAMP2 in mouse lungs and RAW264.7 cells was performed with an adenoviral vector. We measured histological lung injury, lung wet/dry weight (W/D) ratio, and pulmonary myeloperoxidase (MPO) activity to assess lung injury extent. Cell counts in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) were measured using Giemsa staining. The concentration of inflammatory factors was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The polarization of macrophages was evaluated by inducible nitric oxide synthase (iNOS) and F4/80 staining. The activation of cell apoptosis and NF-κB pathway was evaluated using Western blot, TUNEL staining, immunofluorescence, and immunohistochemistry. RESULTS: Overexpression of STAMP2 alleviated CLP-induced lung injury of mice with decreased W/D ratio of the lung, and MPO activity in lung tissue. STAMP2 overexpression reduced the lung infiltration of inflammatory cells, and the levels of TNF-a, IL-6, and macrophage chemoattractant protein-1 (MCP-1) in BALF. Overexpressed STAMP2 inhibited macrophage M1 polarization in lung tissues as indicated by F4/80 and iNOS stainings in lung tissue. STAMP2 overexpression inhibited RAW 264.7 cell apoptosis by increasing Bcl-2 and decreasing Bax and cleaved-caspase 3 expression. Besides, STAMP2 overexpression suppressed nuclear factor κB (NF-κB) p65 pathway activation, as evidenced by reduced phosphorylation of IκBα, and phosphorylation and translocation of NF-κB p65. In vitro study further proved that STAMP2 overexpression suppressed the NF-κB pathway (IκBα/p65) in macrophages and decreased macrophage M1 polarization and M1-associated inflammatory factor production (TNF-a, IL-6, and MCP-1). CONCLUSIONS: Our study for the first time demonstrated that STAMP2 might be able to reduce inflammation in sepsis-induced ALI by inhibiting macrophage M1 polarization through repressing NF-κB signaling activation.