Qiangjingの錠剤は、LKB1/AMPK/ULK1シグナル伝達によって媒介されるミトコンドリアユビキチン化とマイトファジーを介して皮術透過性を改善します

コンテキスト：精子の活力および皮術透過性（AZS）に対するQiangjing錠剤（QJT）の治療効果が確認されています。ただし、作用メカニズムは不明のままです。 目的：この研究では、AZSに対するQJTの効果と基礎となる作用メカニズムを調査します。 材料と方法：60個のSprague-Dawleyラットをランダムに6つのグループに分割しました：コントロール、ORN（Ornidazole; 200 mg/kg）、ORN+QJT-LOW（0.17 g/ml）、Orn+QJT-Middle（0.33 g/ml（0.33 g/ml））、ORN+QJT-HIGH（0.67 g/mL）、およびORN+QJT+RADICICOL（0.67 g/mL QJTおよび20 mg/kg Radicicol）グループ。マイトファジーの病理学的評価と分析は、それぞれH＆E染色と透過型電子顕微鏡によって実施されました。反応性酸素種は、フローサイトメトリーによって検出されました。タンパク質の発現は、ウエスタンブロッティングによって決定されました。 結果：QJTは、ORN処理された精子の運動性と運動学的パラメーター、ならびに精巣および精巣上体組織の病理学的症状を大幅に改善しました。特に、QJTはミトコンドリアの形態障害を軽減し、PHB、Beclin-1、Lc3-IIタンパク質、およびROSレベルを増加させ（P <0.05）、LC3-IおよびP62のタンパク質発現レベルを低下させました（P <0.05）。機械的に、QJTはSCFおよびパーキンタンパク質レベルのダウンレギュレーションに拮抗しました（P <0.05）。さらに、QJTは、LKB1、AMPKα、P-AMPKα、ULK1、およびP-ULK1のタンパク質発現レベルを有意に増加させました（P <0.05）。病理学的症状、ミトコンドリアの形態、およびミトファジーおよびミトコンドリアのユビキチン化関連タンパク質の発現に対するQJTの改善効果は、ラジシコルによって打ち消されました。 議論と結論：QJTは、ミトコンドリアのユビキチン化とLKB1/AMPK/ULK1シグナル伝達経路によって媒介されるミトファジーを介してAZSを改善しました。私たちの研究は、AZSと男性の不妊症の治療の理論的根拠を提供します。

CONTEXT: Therapeutic effects of Qiangjing tablets (QJT) on sperm vitality and asthenozoospermia (AZS) have been confirmed. However, the mechanism of action remains unclear. OBJECTIVE: This study investigates the effects of QJT on AZS and the underlying mechanism of action. MATERIALS AND METHODS: Sixty Sprague-Dawley rats were randomly divided into six groups: Control, ORN (ornidazole; 200 mg/kg), ORN + QJT-low (0.17 g/mL), ORN + QJT-middle (0.33 g/mL), ORN + QJT-high (0.67 g/mL), and ORN + QJT + Radicicol (0.67 g/mL QJT and 20 mg/kg radicicol) groups. Pathological evaluation and analysis of mitophagy were conducted by H&E staining and transmission electron microscopy, respectively. Reactive oxygen species were detected by flow cytometry. Protein expression was determined by Western blotting. RESULTS: QJT significantly improved ORN-treated sperm motility and kinematic parameters, as well as the pathological symptoms of testicular and epididymal tissues. In particular, QJT mitigated impaired mitochondrial morphology, and increased the PHB, Beclin-1, LC3-II protein, and ROS levels (p < 0.05), and reduced the protein expression levels of LC3-I and p62 (p < 0.05). Mechanistically, QJT antagonized the downregulation of SCF and Parkin protein levels (p < 0.05). Furthermore, QJT significantly increased the protein expressions levels of LKB1, AMPKα, p-AMPKα, ULK1 and p-ULK1 (p < 0.05). The ameliorative effect of QJT on pathological manifestations, mitochondrial morphology, and the expressions of mitophagy and mitochondrial ubiquitination-related proteins was counteracted by radicicol. DISCUSSION AND CONCLUSIONS: QJT improved AZS via mitochondrial ubiquitination and mitophagy mediated by the LKB1/AMPK/ULK1 signaling pathway. Our study provides a theoretical basis for the treatment of AZS and male infertility.