アルファヘルペスウイルス潜在性関連プロモーター2を含むAAVベクターの局所および全身投与2は、マウス肝臓、腎臓、骨格筋における強力な導入遺伝子発現を駆動します

アデノ関連ウイルス（AAV）は、強力で遍在する導入遺伝子発現に反応する可能性のある状態の治療源として大きな可能性を秘めています。ただし、その欠点の中で、AAVベクターの遺伝的「ペイロード」は4.9kb未満に制限されており、一般的に使用される遺伝子プロモーターはかなり大きく、転写サイレンシングを受けやすいです。最近、アルファヘルペスウイルス潜時関連プロモーター2（LAP2）と呼ばれる偽菌ウイルス（PRV）のゲノムから得られた短い（404bp）、強力で持続的なプロモーターについて説明しました。ここでは、AAV8-LAP2およびAAV9-LAP2の局所的および全身的投与に応じて、マウス末梢組織における導入遺伝子発現の生体分布と効力を評価しました。これらのベクトルの投与により、より大きなEF1αプロモーターに類似した導入遺伝子発現のレベルが得られることがわかりました。LAP2は、筋肉内送達に応じて全身および骨格筋に投与すると、マウス肝臓と腎臓の強力な導入遺伝子発現を駆動します。特に、骨格筋では、LAP2およびEF1αプロモーターを使用したベクターの投与により、筋線維とEF1αプロモーターの直接的な比較により、筋線維とEF1αプロモーターの直接的な比較により、LAP2が小さいことが明らかになりました。EF1αプロモーターは、AAV8またはAAV9ベクターのIVおよびIM投与後の広範な遺伝子発現をもたらしました。まとめて、これらの発見は、LAP2を含む構成要素が、将来の遺伝子治療プロトコルをサポートするために大規模な治療効果的なペイロードを提供する能力を持っている可能性があることを示唆しています。

Adeno-associated virus (AAV) has great potential as a source of treatments for conditions that might respond to potent and ubiquitous transgene expression. However, among its drawbacks, the genetic "payload" of AAV vectors is limited to <4.9kb and some commonly used gene promoters are sizeable and susceptible to transcriptional silencing. We recently described a short (404bp), potent, and persistent promoter obtained from the genome of pseudorabies virus (PrV) called alphaherpesvirus latency-associated promoter 2 (LAP2). Here, we evaluated the biodistribution and potency of transgene expression in mouse peripheral tissues in response to local and systemic administration of AAV8-LAP2 and AAV9-LAP2. We found that administration of these vectors resulted in levels of transgene expression that were similar to the larger EF1α promoter. LAP2 drives potent transgene expression in mouse liver and kidney when administered systemically and in skeletal muscle in response to intramuscular delivery. Notably, in skeletal muscle, administration of vectors with LAP2 and EF1α promoters resulted in preferential transduction of myofibers type 2. A direct side-by-side comparison between LAP2 and the EF1α promoter revealed that, despite its smaller size, LAP2 was equally potent to the EF1α promoter and resulted in widespread gene expression after IV and IM administration of AAV8 or AAV9 vectors. Collectively, these findings suggest that constructs that include LAP2 may have the capacity to deliver large therapeutically effective payloads in support of future gene therapy protocols.