HT22細胞におけるグルタミン酸媒介神経毒性に対するフルチコサ（EEPF）のエタノール抽出物の神経保護効果

伝統的な漢方薬では、polyscias fruticosaは虚血と炎症の治療に頻繁に使用されてきました。グルタミン酸レベルの上昇によって媒介される酸化ストレスは、虚血およびさまざまな神経変性疾患の神経細胞死を引き起こします。しかし、これまでのところ、グルタミン酸媒介細胞死に対するこの植物抽出物の神経保護効果は、細胞モデルでは調査されていません。現在の研究では、フルティコサ多筋腫（EEPF）のエタノール抽出物の神経保護効果を調査し、グルタミン酸媒介細胞死に対する神経保護に関連するEEPFの基礎となる分子メカニズムを解明します。酸化ストレス媒介細胞死は、HT22細胞で5 mMグルタミン酸処理によって誘導されました。細胞生存率は、テトラゾリウムベースのEZ-Cytox試薬とカルセイン-AM AM蛍光色素によって測定されました。細胞内Ca2+およびROSレベルは、それぞれ蛍光色素、Fluo-3 amおよび2 '、7'-ジクロロジヒドロフルオレオレセインジアセテート（DCF-DA）によって測定されました。P-AKT、BDNF、P-CREB、BAX、BCL-2、およびアポトーシス誘導因子（AIF）のタンパク質発現は、ウエスタンブロット分析によって決定されました。アポトーシス細胞死は、フローサイトメトリーによって測定されました。EEPFの生体内有効性は、手術誘発性脳虚血によってモンゴルのガービルマウスを使用して評価されました。EEPF治療は、グルタミン酸誘発細胞死に対する神経保護効果を示しました。EEPFの共治療により、細胞内Ca2+およびROSおよびアポトーシス細胞死が減少しました。さらに、グルタミン酸により減少したP-AKT、P-CREB、BDNF、およびBcl-2レベルを回収しました。EEPF共治療は、アポトーシスBAXの活性化、AIFの核移行、およびマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）経路タンパク質（ERK1/2、P38、JNK）の活性化を抑制しました。さらに、EEPF治療は、虚血誘発モンゴルのガービルでin vivoモデルで変性ニューロンを著しく救助しました。EEPFは、グルタミン酸媒介神経毒性を抑制する神経保護特性を示しました。EEPFの基礎となるメカニズムは、細胞生存に関連するP-AKT、P-CREB、BDNF、およびBCL-2のレベルを高めています。グルタミン酸媒介神経病理学の治療の治療の可能性があります。

In traditional herbal medicine, the Polyscias fruticosa has been frequently used for the treatment of ischemia and inflammation. Oxidative stress mediated by elevated glutamate levels cause neuronal cell death in ischemia and various neurodegenerative diseases. However, so far, the neuroprotective effects of this plant extract against glutamate-mediated cell death have not been investigated in cell models. The current study investigates the neuroprotective effects of ethanol extracts of Polyscias fruticosa (EEPF) and elucidates the underlying molecular mechanisms of EEPFs relevant to neuroprotection against glutamate-mediated cell death. The oxidative stress-mediated cell death was induced by 5 mM glutamate treatment in HT22 cells. The cell viability was measured by a tetrazolium-based EZ-Cytox reagent and Calcein-AM fluorescent dye. Intracellular Ca2+ and ROS levels were measured by fluorescent dyes, fluo-3 AM and 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DA), respectively. Protein expressions of p-AKT, BDNF, p-CREB, Bax, Bcl-2, and apoptosis-inducing factor (AIF) were determined by western blot analysis. The apoptotic cell death was measured by flow cytometry. The in vivo efficacy of EEPF was evaluated using the Mongolian gerbil mouse by surgery-induced brain ischemia. EEPF treatment showed a neuroprotective effect against glutamate-induced cell death. The EEPF co-treatment reduced the intracellular Ca2+ and ROS and apoptotic cell death. Furthermore, it recovered the p-AKT, p-CREB, BDNF, and Bcl-2 levels decreased by glutamate. The EEPF co-treatment suppressed the activation of apoptotic Bax, the nuclear translocation of AIF, and mitogen-activated protein kinase (MAPK) pathway proteins (ERK1/2, p38, JNK). Further, EEPF treatment significantly rescued the degenerative neurons in the ischemia-induced Mongolian gerbil in vivo model. EEPF exhibited neuroprotective properties that suppress glutamate-mediated neurotoxicity. The underlying mechanism of EEPF is increasing the level of p-AKT, p-CREB, BDNF, and Bcl-2 associated with cell survival. It has therapeutic potential for the treatment of glutamate-mediated neuropathology.