Eudragit-Coated Chitosan-tripterygiumグリコシドコンジュゲートミクロスフェアは、TLR4/NF-κBシグナル伝達経路を阻害することにより、DSS誘発性実験大腸炎を緩和します。

目的：グリコシドトリプリテリー（TG）は、TLRシグナル伝達経路に関連する抗炎症特性を備えたwilfordiiの脂肪可溶性抽出物です。この研究では、実験的大腸炎の標的送達システム、すなわちEudragit（EUL）コーティングされたキトサン（CH）-TGコンジュゲートミクロスフェア（CH-TG-MS/EUL）を構築し、その治療効果と基礎メカニズムを評価しました。 方法：CH-TG-MSは、乳化架橋技術を使用して製造され、EULでコーティングしてCH-TG-MS/EULを作成しました。薬物放出特性は、透析モデルを使用して評価されました。さらに、結腸炎症に対するCH-TG-MS/EULの治療上の利点と、腸粘膜におけるTLR4/NF-κBシグナル伝達に対するその特異的効果は、DSS誘発性マウス大腸炎モデルを使用してin vivoで評価されました。 結果：CH-TG-MS/EULミクロスフェアは、形状、粗い表面、癒着がわずかに拡大した黄色の粉末として現れました。CH-TG-MS/EUL製剤は、高い閉じ込め効率と薬物負荷率も示しました。高性能液体クロマトグラフィーは、CH-TG-MS/EULが遊離TGよりも激しいピークを示していることを明らかにし、薬物が製剤に含まれていることを確認しました。Free TGは投与の最初の5時間以内に爆発的な放出を表示し、CH-TG-MS/EULはTGの事前に成熟した放出を防ぎ、最大24時間までの制御可能な放出を示しました。in vivoでは、遊離TGと比較して、CH-TG-MS/EULで腸粘膜組織破壊の顕著な改善が達成されました。さらに、免疫組織化学およびウエスタンブロッティングの結果は、CH-TG-MS/EULが腸粘膜TLR4、MyD88、およびNF-κBP65の発現を著しくダウンレギュレートしたことを明らかにしました。したがって、CH-TG-MS/EULは、TLR4/NF-κBシグナル伝達の過剰活性化を阻害することにより、結腸炎症反応を改善する可能性があります。 結論：新しいCH-TG-MS/EULの準備は、TLR4/NF-κB過活性を阻害することにより、UC治療薬の結腸送達システムを表す可能性があります。 データの可用性：この研究の結論をサポートするすべての実験データは、合理的な要求に応じて対応する著者から入手できます。

OBJECTIVE: Tripterygium glycoside (TG) is a fat-soluble extract of Tripterygium wilfordii, with anti-inflammatory properties associated with TLR signaling pathways. This study constructed a targeted delivery system for experimental colitis, namely, eudragit (EuL)-coated chitosan (Ch)-TG conjugate microspheres (Ch-TG-MS/EuL), and evaluated its therapeutic efficacy and underlying mechanisms. METHODS: Ch-TG-MS was fabricated using emulsification cross-linking technique and then coated with EuL to create Ch-TG-MS/EuL. Drug release properties were assessed using a dialysis model. Additionally, the therapeutic benefits of Ch-TG-MS/EuL on colonic inflammation and its specific effect on TLR4/NF-κB signaling in intestinal mucosa were evaluated in vivo using a DSS-induced murine colitis model. RESULTS: The Ch-TG-MS/EuL microspheres appeared as yellow powders with a slightly enlarged shape, rough surface, and adhesions. The Ch-TG-MS/EuL formulations also exhibited high entrapment efficiency and drug loading rate. High-performance liquid chromatography revealed that Ch-TG-MS/EuL exhibited a less intense peak than free TG, confirming that the drug is contained within the formulation. Free TG displayed explosive release within the first 5 h of administration, while Ch-TG-MS/EuL prevented the pre-mature release of TG and exhibited controllable release up to 24 h. In vivo, noticeable amelioration of intestinal mucosal tissue destruction was achieved with Ch-TG-MS/EuL compared to free TG. Additionally, immunohistochemical and western blotting results revealed that Ch-TG-MS/EuL markedly down-regulated the expression of intestinal mucosal TLR4, MyD88, and NF-κB p65. Hence, Ch-TG-MS/EuL may ameliorate the colon inflammatory response by inhibiting the hyperactivation of TLR4/NF-κB signaling. CONCLUSION: Novel Ch-TG-MS/EuL preparation may represent a colonic delivery system for UC therapeutics by inhibiting TLR4/NF-κB hyperactivation. DATA AVAILABILITY: All experimental data supporting the conclusions of this study are available from the corresponding author on reasonable request.