骨格筋の再生からの繊維流原性前駆細胞を持つ筋肉幹細胞とのマクロファージの共培養

成体の筋肉幹細胞は、損傷後に筋線維を再構築します。成人筋原性プログラムを実装するのは非常に強力ですが、効率的かつ完全な再生のために周囲の細胞が提供する環境の手がかりが必要です。筋肉幹細胞環境には、線維脂肪原性の前駆体、血管細胞、およびマクロファージが含まれます。近隣で確立される相互作用の筋肉幹細胞の複雑さを解読する方法は、筋肉から新たに分離された細胞を共培養し、1つの細胞型が他の細胞型の行動/運命に与える影響を評価することです。ここでは、蛍光活性化細胞選別（FACS）または磁気細胞分離（MACS）とともに、短い時間窓のための特定のセットアップを使用して分離細胞のin vivo特性を維持するための共培養法（MAC）による原発性筋幹細胞、マクロファージ、および線維脂肪原性前駆体の分離を可能にするプロトコルを提示します。

Adult muscle stem cells rebuild myofibers after damage. Although they are highly powerful to implement the adult myogenic program, they need environmental cues provided by surrounding cells for efficient and complete regeneration. Muscle stem cell environment includes fibroadipogenic precursors, vascular cells, and macrophages. A way to decipher the complexity of the interactions muscle stem cells establish with their neighborhood is to co-culture cells freshly isolated from the muscle and assess the impact of one cell type on the behavior/fate of the other cell type. Here, we present a protocol allowing the isolation of primary muscle stem cells, macrophages, and fibroadipogenic precursors by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS) or Magnetic Cell Separation (MACS), together with co-culture methods using a specific setup for a short time window to keep as much as possible the in vivo properties of the isolated cells.