レスベラトロール誘発SIRT1活性化は、HIF-1αとは無関係に関節リウマチ条件下での解溶分解燃料血管新生を阻害します

目的：この研究では、Rheumatoid関節炎（RA）関連血管新生に対するSIRT1活性化の影響を調査しました。 方法：HUVECは異なるヒト血清によって培養されました。細胞内代謝物はUPLC-MSによって定量化されました。次に、異なる炎症条件下でのHUVECSおよびラット血管上皮細胞は、SIRT1アゴニストレスベラトロール（RSV）によって処理されました。サイトカインと生化学的指標は、対応するキットによって検出されました。タンパク質およびmRNA発現レベルは、それぞれ免疫ブロッティングとPCR法によって評価されました。血管新生能力は、移動、創傷治癒、チューブ形成実験によって評価されました。特定のシグナルをダウンレギュレートするために、遺伝子特異的なsiRNAが適用されました。 結果：メタボロミクスの研究により、RA血清処理されたHUVECの加速解糖が明らかになりました。ATPの蓄積につながりましたが、GTPレベルには影響しませんでした。RSVは、両方の細胞で血管新生促進性サイトカインの産生と解糖を阻害し、血管新生の可能性を損ないました。これらの効果は、HIF-1αにほとんど依存しないリポ多糖（LPS）プライミングHuvecsのエネルギー代謝界面のビキニによって模倣されました。RSVとビキニンの両方は、GTP依存性経路Rho/Rockの活性化を阻害し、VEGF産生を減少させることができます。RHOAシグナル伝達の廃止により、LPS刺激HUVECのHIF-1αサイレンシング溶けの変化が強化され、RSVの抗血管新生の可能性が隠されました。 結論：解糖は、RA被験者のRho/ROCK活性化を維持するための追加のエネルギーを提供します。これは、VEGF駆動型の血管新生を促進し、SIRT1活性化によって阻害される可能性があります。

OBJECTIVE: This study investigated the impacts of SIRT1 activation on rheumatoid arthritis (RA)-related angiogenesis. METHODS: HUVECs were cultured by different human serum. Intracellular metabolites were quantified by UPLC-MS. Next, HUVECs and rat vascular epithelial cells under different inflammatory conditions were treated by a SIRT1 agonist resveratrol (RSV). Cytokines and biochemical indicators were detected by corresponding kits. Protein and mRNA expression levels were assessed by immunoblotting and PCR methods, respectively. Angiogenesis capabilities were evaluated by migration, wound-healing and tube-formation experiments. To down-regulate certain signals, gene-specific siRNA were applied. RESULTS: Metabolomics study revealed the accelerated glycolysis in RA serum-treated HUVECs. It led to ATP accumulation, but did not affect GTP levels. RSV inhibited pro-angiogenesis cytokines production and glycolysis in both the cells, and impaired the angiogenesis potentials. These effects were mimicked by an energy metabolism interrupter bikini in lipopolysaccharide (LPS)-primed HUVECs, largely independent of HIF-1α. Both RSV and bikinin can inhibit the activation of the GTP-dependent pathway Rho/ROCK and reduce VEGF production. Abrogation of RhoA signaling reinforced HIF-1α silencing-brought changes in LPS-stimulated HUVECs, and overshadowed the anti-angiogenesis potentials of RSV. CONCLUSION: Glycolysis provides additional energy to sustain Rho/ROCK activation in RA subjects, which promotes VEGF-driven angiogenesis and can be inhibited by SIRT1 activation.