DDIT4は、NF-κB経路と上皮間葉系移行の活性化を介してリンパ節転移を促進します

この研究は、新規転移促進分子を特定し、子宮頸がんの機能的および予後的役割を解明することを目的としていました。低酸素誘導性遺伝子であるDDIT4（DNA-DAMAGE誘導性転写産物4）は、複数のマイクロアレイデータベースを分析することで同定されました。免疫組織化学におけるDDIT4発現と、パブリックデータベースの臨床病理学的特性とコホートの相関関係は、統計分析によって評価されました。Transwell®アッセイと細胞の移動と浸潤を決定するための創傷治癒アッセイが行われました。DDIT4は、siRNAまたはレンチウイルスベクターを使用してノックダウンされました。DDIT4の潜在的なダウンストリーム経路は、遺伝子セットの濃縮分析とウエスタンブロッティングによって調査および検証されました。in vivo転移能力は、腹腔内注射マウスモデルを使用して決定されました。パブリックデータベースとコホートの分析では、DDIT4高発現は、初期段階の子宮頸がん患者の全生存期間とリンパ節転移の短いと有意に関連していました。DDIT4のノックダウンは、in vitroで腫瘍細胞の移動と浸潤活性を減衰させ、子宮頸がん細胞における上皮間葉系遷移（EMT）関連タンパク質およびNF-κB経路の発現を減少させました。DDIT4は、マウスモデルの腫瘍の進行も促進しました。我々の結果は、DDIT4が子宮頸がんの予後指標であり、リンパ節転移を促進し、EMTおよびNF-KB経路を介して悪性腫瘍を増強できることを示しています。

This study was aimed to identify a novel metastasis-promoting molecule and elucidate its functional and prognostic roles in cervical cancer. DDIT4 (DNA-damage-inducible transcript 4), a hypoxia-inducible gene, was identified by analyzing multiple microarray databases. The correlation between DDIT4 expression in immunohistochemistry and clinicopathological characteristics in the public database and our cohort was evaluated by statistical analysis. Transwell® assay and wound-healing assay to determine cell migration and invasion were performed. DDIT4 was knocked down using siRNA or lentiviral vectors. The potential downstream pathways of DDIT4 were explored and verified by a gene set enrichment analysis and western blotting. The in vivo metastatic capability was determined with the use of an intraperitoneal injection mouse model. In the analysis of the public database and our cohort, DDIT4 high expression was significantly related to short overall survival and lymph node metastasis in patients with early-stage cervical cancer. The knockdown of DDIT4 attenuated the migration and invasion activity of tumor cells in vitro and reduced the expression of epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins and the NF-κB pathway in cervical cancer cells. DDIT4 also promoted tumor progression in the mouse model. Our results indicate that DDIT4 can be a prognostic indicator in cervical cancer and promote lymph node metastasis, augmenting malignancy via the EMT and NF-kB pathways.