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Bio-protocol2023Jun05Vol.13issue(11)

タンパク質の半減期を調べるためのシクロヘキシミド(CHX)チェイスアッセイ

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

シクロヘキシミド(CHX)は、殺菌剤として作用するStreptomyces Griseusに由来する小分子です。リボソーム阻害剤として、CHXは真核生物タンパク質合成の翻訳伸長を制限することができます。タンパク質合成がCHXによって阻害されると、プロテアソームまたはリソソーム系を介して分解することにより細胞内タンパク質のレベルが減少します。したがって、CHX Chaseアッセイは広く認識されており、細胞内タンパク質分解を観察し、真核生物の特定のタンパク質の半減期を決定するために使用されます。ここでは、CHXチェイスアッセイの完全な実験手順を提示します。グラフィカルな概要。

シクロヘキシミド(CHX)は、殺菌剤として作用するStreptomyces Griseusに由来する小分子です。リボソーム阻害剤として、CHXは真核生物タンパク質合成の翻訳伸長を制限することができます。タンパク質合成がCHXによって阻害されると、プロテアソームまたはリソソーム系を介して分解することにより細胞内タンパク質のレベルが減少します。したがって、CHX Chaseアッセイは広く認識されており、細胞内タンパク質分解を観察し、真核生物の特定のタンパク質の半減期を決定するために使用されます。ここでは、CHXチェイスアッセイの完全な実験手順を提示します。グラフィカルな概要。

Cycloheximide (CHX) is a small molecule derived from Streptomyces griseus that acts as fungicide. As a ribosome inhibitor, CHX can restrict the translation elongation of eukaryotic protein synthesis. Once protein synthesis is inhibited by CHX, the level of intracellular proteins decreases by degradation through the proteasome or lysosome system. Thus, the CHX chase assay is widely recognized and used to observe intracellular protein degradation and to determine the half-life of a given protein in eukaryotes. Here, we present a complete experimental procedure of the CHX chase assay. Graphical overview.

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