乳がん細胞と脂肪由来間質細胞または脂肪細胞との直接接触によって媒介されるCCL5/CCR1発現を調査するための3次元乳がんモデル

乳がんの腫瘍微小環境（TME）は、脂肪由来間質細胞（ASCS）や脂肪脂肪パッドの局所浸潤に起因する脂肪組織由来細胞などの脂肪組織内での細胞の複雑なクロストークによって決定されます。これは、これらの細胞タイプ間のヘテロタイプの細胞接触につながります。in vivo様3D環境での特定の細胞間相互作用を適切に模倣するために、MDA-MB-231またはMCF-7乳癌細胞と組み合わせてASCまたは分化脂肪細胞を使用して、直接共培養スフェロイドモデルを開発しました。共球球は、高スループットプロセスで明確に定義された再現性のある方法で生成されました。これらの共球体における腫瘍促進ケモカインCCL5とその同族受容体の発現を、間接的かつ直接的な標準2D共培養と比較しました。CCL5、特に細胞細胞の接触と培養の次元に厳密に依存している受容体CCR1の顕著なアップレギュレーションが明らかでした。さらに、ASCSと腫瘍細胞間の直接接触の影響と、腫瘍細胞の移動の促進におけるCCR1の関与が実証されました。全体として、これらの結果は、組織のような状況における複雑な腫瘍と腫瘍の相互作用をよりよく表すために、直接的な3D共培養モデルの重要性を示しています。3D共培養スフェロイドで実証されているように、隣接する間質細胞との直接細胞細胞接触時にアップレギュレートされた腫瘍特異的マーカーの除幕は、浸潤性乳房の診断と治療のための新しい標的を見つけるための有望な戦略を表している可能性があります癌。

The tumor microenvironment (TME) in breast cancer is determined by the complex crosstalk of cancer cells with adipose tissue-inherent cells such as adipose-derived stromal cells (ASCs) and adipocytes resulting from the local invasion of tumor cells in the mammary fat pad. This leads to heterotypic cellular contacts between these cell types. To adequately mimic the specific cell-to-cell interaction in an in vivo-like 3D environment, we developed a direct co-culture spheroid model using ASCs or differentiated adipocytes in combination with MDA-MB-231 or MCF-7 breast carcinoma cells. Co-spheroids were generated in a well-defined and reproducible manner in a high-throughput process. We compared the expression of the tumor-promoting chemokine CCL5 and its cognate receptors in these co-spheroids to indirect and direct standard 2D co-cultures. A marked up-regulation of CCL5 and in particular the receptor CCR1 with strict dependence on cell-cell contacts and culture dimensionality was evident. Furthermore, the impact of direct contacts between ASCs and tumor cells and the involvement of CCR1 in promoting tumor cell migration were demonstrated. Overall, these results show the importance of direct 3D co-culture models to better represent the complex tumor-stroma interaction in a tissue-like context. The unveiling of tumor-specific markers that are up-regulated upon direct cell-cell contact with neighboring stromal cells, as demonstrated in the 3D co-culture spheroids, may represent a promising strategy to find new targets for the diagnosis and treatment of invasive breast cancer.