euglena gracilis：蛍光酸錯体および異なる栄養条件によって調節された膜結合外菌 - ホスファターゼ活性の生化学的特性

腸ホスファターゼは、異なるリン酸化された基質を加水分解できる細胞外環境に面した触媒部位を持つ細胞表面に密接に関連する酵素のグループに属します。現在の研究では、モデルの微生物である淡水微細藻類Euglena Gracilisの外膜ホスファターゼ活性を生化学的に特徴付けました。腸ホスファターゼ活性は酸性であり、銅によって刺激され、次の見かけの速度論的パラメーターを示します：km = 2.52±0.12 mm p-nppおよびvmax = 3.62±0.06 nmol P-NP×H-1×106細胞。私たちは、亜鉛、オルソバナデート、モリブデート、フッ化物、および無機リン酸塩が異なる大きさでエクトホスファターゼ活性を阻害することを観察しました。フルオロアルミネート複合体は、このエクトホスファターゼ活性の阻害剤でもあります。それらは酵素反応条件で形成され、E。gracilisが見つかる自然環境で発生する可能性があります。腸ホスファターゼ活性は、培養成長段階を通じて一定であり、光栄養性から従属栄養代謝への移行が可能性が高い場合、暗所で連続的に亜培養後に負に調節されます。これらの生化学的パラメーターの分析は、自然環境におけるE. gracilis ecto-ホスファターゼ活性の役割の理解に貢献する可能性があります。

The ecto-phosphatases belong to a group of enzymes closely associated with the cell surface that has its catalytic site facing the extracellular environment, where different phosphorylated substrates can be hydrolyzed. In the present work, we biochemically characterized the ecto-phosphatase activity of the freshwater microalgae Euglena gracilis, a model microorganism, ubiquitously distributed and resistant to several environmental stressors. The ecto-phosphatase activity is acidic, stimulated by copper and presents the following apparent kinetic parameters: Km = 2.52 ± 0.12 mM p-NPP and Vmax = 3.62 ± 0.06 nmol p-NP × h-1 × 106 cells. We observed that zinc, orthovanadate, molybdate, fluoride, and inorganic phosphate inhibit the ecto-phosphatase activity with different magnitudes. Fluoroaluminate complexes are also inhibitors of this ecto-phosphatase activity. They can be formed in the enzyme reaction conditions and are likely to occur in a natural environment where E. gracilis can be found. The ecto-phosphatase activity is constant through the culture growth phases and is negatively modulated after continuous subculturing in the dark when a shift from phototrophic to the heterotrophic metabolism is likely. The analysis of those biochemical parameters may contribute to understanding the role of E. gracilis ecto-phosphatase activity in natural environments.