樹状細胞サブセットにおけるTLRの役割を研究するためのCRISPR/CAS9テクノロジーの使用

樹状細胞（DCS）は、侵略者を検出し、免疫応答を開始してそれらを排除するセンチネルとして機能することにより、自然免疫と適応免疫の両方を調整する上で重要な役割を果たし、抗原と文脈に特有の適応免疫応答を活性化する抗原を提示する検出されました。DC機能の調節は複雑であり、転写因子やシグナル伝達経路などの細胞内ドライバー、および微小環境における接着分子、ケモカイン、およびその受容体との細胞間相互作用を含みます。Toll様受容体（TLR）は、DCSが病原体関連分子パターン（PAMP）を検出し、MHCクラスII発現のアップレギュレーションを含む適応免疫を備えたDC成熟と教育につながる下流シグナル伝達経路を開始するために重要です。CD80、CD86、およびCD40、および自然サイトカインの産生。DCが自然免疫刺激に応答して適応反応に変換するために使用するTLR経路を理解することは、新しい治療標的の識別に重要です。'TLR依存性活性化。CRISPR/CAS9スクリーニングを使用して、さまざまな樹状細胞サブセットの個々のTLR遺伝子を標的とすることで、樹状細胞の活性化とサイトカイン産生を調節するTLR依存性経路の識別が可能になります。このアプローチは、TLRドライバー遺伝子の効率的なターゲティングを提供して、免疫応答を調節し、新しい免疫応答調節因子を特定し、これらの調節因子と遺伝子型に基づいた機能的表現型との因果関係を確立します。

Dendritic cells (DCs) have a significant role in coordinating both innate and adaptive immunity by serving as sentinels that detect invaders and initiate immune responses to eliminate them, as well as presenting antigens to activate adaptive immune responses that are specific to the antigen and the context in which it was detected. The regulation of DC functions is complex and involves intracellular drivers such as transcription factors and signaling pathways, as well as intercellular interactions with adhesion molecules, chemokines, and their receptors in the microenvironment. Toll-like receptors (TLRs) are crucial for DCs to detect pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) and initiate downstream signaling pathways that lead to DC maturation and education in bridging with adaptive immunity, including the upregulation of MHC class II expression, induction of CD80, CD86, and CD40, and production of innate cytokines. Understanding the TLR pathways that DCs use to respond to innate immune stimuli and convert them into adaptive responses is important for new therapeutic targets identification.We present a novel platform that offers a fast and affordable CRISPR-Cas9 screening of genes that are involved in dendritic cells' TLR-dependent activation. Using CRISPR/Cas9 screening to target individual TLR genes in different dendritic cell subsets allows the identification of TLR-dependent pathways that regulate dendritic cell activation and cytokine production. This approach offers the efficient targeting of TLR driver genes to modulate the immune response and identify novel immune response regulators, establishing a causal link between these regulators and functional phenotypes based on genotypes.