抗組織因子経路阻害剤モノクローナル抗体マルスタシマブの発症中の抗皮膚抗体アッセイの進化

組織因子経路阻害剤（TFPI）は、外因性凝固経路の内因性阻害剤です。血友病AまたはBの患者では、TFPIの阻害は、外因性凝固経路を増強する代替治療アプローチです。Marstacimabは、TFPIを結合および中和する治療完全にヒトモノクローナル抗体であり、阻害剤（凝固因子に対する抗体）を伴うまたは伴わない、重度の血友病AまたはB患者の出血エピソードの頻度を予防または減少させるための予防的治療として評価されています。ただし、マルスタシマブの有効性、安全性、および薬物動態は、抗皮膚抗体抗体（ADA）応答の誘導の影響を受ける可能性があります。ここでは、マルスタシマブADAを検出するための3つの準定量的電気化学化学ベースの方法の進化と検証について説明します。血友病。3つの方法すべてについて、検証基準は、スクリーニングおよび確認のカットポイント、精度、選択性、薬物耐性、ターゲット干渉、および安定性におけるアッセイのパフォーマンスを評価しました。検証のための追加の基準は、希釈線形性（方法1および2）および低陽性対照濃度、プロゾーン効果、プレートの均一性、および堅牢性でした（方法3）。3つの方法は検証基準を満たしており、血友病患者の治療中にマルスタシマブADAの誘導を検出する潜在的に貴重なツールです。

Tissue factor pathway inhibitor (TFPI) is an endogenous inhibitor of the extrinsic coagulation pathway. In patients with hemophilia A or B, inhibition of TFPI is an alternative therapeutic approach that augments the extrinsic coagulation pathway. Marstacimab is an investigational fully human monoclonal antibody that binds and neutralizes TFPI and is being evaluated as a prophylactic treatment to prevent or reduce the frequency of bleeding episodes in patients with severe hemophilia A or B, with or without inhibitors (antibodies against coagulation factors). However, the efficacy, safety, and pharmacokinetics of marstacimab may be affected by the induction of antidrug antibody (ADA) responses. Here, we describe the evolution and validation of three quasi-quantitative electrochemiluminescence-based methods to detect marstacimab ADAs, starting from their use in a first-in-human phase 1 study to their use in phase 2 and 3 clinical studies of patients with severe hemophilia. For all three methods, validation criteria evaluated the performance of the assays in screening and confirmatory cut points, precision, selectivity, drug tolerance, target interference, and stability. Additional criteria for validation were dilution linearity (Methods 1 and 2) and low positive control concentration, prozone effect, plate homogeneity, and robustness (Method 3). The three methods met validation criteria and are a potentially valuable tool in detecting the induction of marstacimab ADAs during treatment in patients with hemophilia.