発がん性 Ras と ΔNp63α は、扁平上皮がん発症のマウスモデルにおいて協力して免疫抑制性の多形核骨髄由来サプレッサー細胞を動員します

はじめに: p63 ファミリーのアイソフォームの中でも腫瘍タンパク質 ΔNp63 をコードするヒト染色体 3q26-29 の増幅は、複数の組織起源の扁平上皮癌 (SCC) に共通の特徴です。ΔNp63 の過剰発現に加えて、過剰発現または発がん性変異によるがん原遺伝子 RAS の活性化が、多くのがんで頻繁に観察されます。この研究では、The Cancer Genome Atlas (TCGA) のトランスクリプトーム データの分析により、進行性頭頸部扁平上皮癌 (HNSCC) では TP63 mRNA、特に ΔNp63 アイソフォーム、および HRAS の発現が有意に上昇していることが実証され、病理学的重要性が示唆されています。しかし、共過剰発現されたΔNp63 と HRAS が免疫抑制性腫瘍微小環境 (TME) にどのように影響するかは完全には理解されていません。 方法：ここで我々は、免疫TMEにおけるこれらの癌遺伝子の役割を評価するために、ΔNp63αのレトロウイルス媒介過剰発現および構成的に活性化されたHRAS（v-rasHa G12R）を有する初代ケラチノサイトを使用して、免疫適格マウスモデルを確立および特徴付けた。 結果: このモデルでは、v-rasHa と高レベルの ΔNp63α の両方を発現する野生型同系ケラチノサイトの同所性移植は、同系宿主に一貫して癌腫を生じますが、v-rasHa のみを発現する細胞は主に乳頭腫を生じます。我々は、免疫抑制性であることが実験的に検証され、したがって骨髄由来サプレッサー細胞（PMN-MDSC）に相当する多形核（PMN）骨髄細胞が、ΔNp63α/v-rasHa発現細胞の同所性移植後の早期に発生した癌腫のTMEに有意に動員されることを発見した。ケラチノサイト。ΔNp63α/v-rasHa誘発性癌は、v-rasHa誘発性腫瘍と比較して、MDSCの動員に関与するとされるケモカインをより高いレベルで発現しており、ΔNp63α/HRAS誘発性癌と免疫抑制性TMEの発症との間にこれまで記載されていない関連性が提供された。 結論：これらの結果は、局所免疫抑制の発生の根底にあるメカニズムを研究するために、悪性腫瘍の特定のゲノムドライバーを含む遺伝的発がんモデルの利用を裏付けています。

INTRODUCTION: Amplification of human chromosome 3q26-29, which encodes oncoprotein ΔNp63 among other isoforms of the p63 family, is a feature common to squamous cell carcinomas (SCCs) of multiple tissue origins. Along with overexpression of ΔNp63, activation of the protooncogene, RAS, whether by overexpression or oncogenic mutation, is frequently observed in many cancers. In this study, analysis of transcriptome data from The Cancer Genome Atlas (TCGA) demonstrated that expression of TP63 mRNA, particularly ΔNp63 isoforms, and HRAS are significantly elevated in advanced squamous cell carcinomas of the head and neck (HNSCCs), suggesting pathological significance. However, how co-overexpressed ΔNp63 and HRAS affect the immunosuppressive tumor microenvironment (TME) is incompletely understood. METHODS: Here, we established and characterized an immune competent mouse model using primary keratinocytes with retroviral-mediated overexpression of ΔNp63α and constitutively activated HRAS (v-rasHa G12R) to evaluate the role of these oncogenes in the immune TME. RESULTS: In this model, orthotopic grafting of wildtype syngeneic keratinocytes expressing both v-rasHa and elevated levels of ΔNp63α consistently yield carcinomas in syngeneic hosts, while cells expressing v-rasHa alone yield predominantly papillomas. We found that polymorphonuclear (PMN) myeloid cells, experimentally validated to be immunosuppressive and thus representing myeloid-derived suppressor cells (PMN-MDSCs), were significantly recruited into the TME of carcinomas arising early following orthotopic grafting of ΔNp63α/v-rasHa-expressing keratinocytes. ΔNp63α/v-rasHa-driven carcinomas expressed higher levels of chemokines implicated in recruitment of MDSCs compared to v-rasHa-initiated tumors, providing a heretofore undescribed link between ΔNp63α/HRAS-driven carcinomas and the development of an immunosuppressive TME. CONCLUSION: These results support the utilization of a genetic carcinogenesis model harboring specific genomic drivers of malignancy to study mechanisms underlying the development of local immunosuppression.