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Stem cell reports2023Aug24Vol.issue()

gonocyte様細胞に分化できるMarmoset PGCLCのmRNAベースの生成

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

霊長類の生殖細胞の発達は、サンプル収集の制限と開発の長さのために、ほとんど未踏のままです。マウスでは、多能性幹細胞(PSC)に由来する原始生殖細胞様細胞(PGCLC)は、in vitro培養またはin vivo移植によって機能的な配偶子に発達する可能性があります。霊長類における成熟した配偶子のこのようなPGCLCを介した誘導は、人間の生殖細胞の発達を理解するのに非常に役立ちます。マーモセットは他の種よりも早く機能的な精子を生成するため、男性生殖細胞の発達プロセス全体を要約することは技術的に可能です。ここでは、MarmosetsのPGCLCを介してGonocyte様細胞にiPSCの分化を誘導しました。最初に、PGCLCを効率的に生成するためのmRNAトランスフェクションベースの方法を開発しました。その後、PGCLCの分化を促進するために、マウス腎カプセルでxenoreconstituted testes(xrtestes)が生成されました。PGCLCは、進行性DNA脱メチル化と発達マーカー遺伝子の段階的発現を示します。この研究は、マーモセット生殖細胞の発達の研究のための効率的なプラットフォームを提供します。

霊長類の生殖細胞の発達は、サンプル収集の制限と開発の長さのために、ほとんど未踏のままです。マウスでは、多能性幹細胞(PSC)に由来する原始生殖細胞様細胞(PGCLC)は、in vitro培養またはin vivo移植によって機能的な配偶子に発達する可能性があります。霊長類における成熟した配偶子のこのようなPGCLCを介した誘導は、人間の生殖細胞の発達を理解するのに非常に役立ちます。マーモセットは他の種よりも早く機能的な精子を生成するため、男性生殖細胞の発達プロセス全体を要約することは技術的に可能です。ここでは、MarmosetsのPGCLCを介してGonocyte様細胞にiPSCの分化を誘導しました。最初に、PGCLCを効率的に生成するためのmRNAトランスフェクションベースの方法を開発しました。その後、PGCLCの分化を促進するために、マウス腎カプセルでxenoreconstituted testes(xrtestes)が生成されました。PGCLCは、進行性DNA脱メチル化と発達マーカー遺伝子の段階的発現を示します。この研究は、マーモセット生殖細胞の発達の研究のための効率的なプラットフォームを提供します。

Primate germ cell development remains largely unexplored due to limitations in sample collection and the long duration of development. In mice, primordial germ cell-like cells (PGCLCs) derived from pluripotent stem cells (PSCs) can develop into functional gametes by in vitro culture or in vivo transplantation. Such PGCLC-mediated induction of mature gametes in primates is highly useful for understanding human germ cell development. Since marmosets generate functional sperm earlier than other species, recapitulating the whole male germ cell development process is technically more feasible. Here, we induced the differentiation of iPSCs into gonocyte-like cells via PGCLCs in marmosets. First, we developed an mRNA transfection-based method to efficiently generate PGCLCs. Subsequently, to promote PGCLC differentiation, xenoreconstituted testes (xrtestes) were generated in the mouse kidney capsule. PGCLCs show progressive DNA demethylation and stepwise expression of developmental marker genes. This study provides an efficient platform for the study of marmoset germ cell development.

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