CD86とCD206の両方を発現する明確なミクログリア細胞集団は、支配的なタイプを構成し、網膜変性の2つのマウスモデルで食作用を実行します

ミクログリア細胞は、網膜変性（RD）中の炎症の重要な調節因子であり、従来はM1またはM2として分類されています。ただし、M1/M2分類が網膜におけるミクログリア細胞の機能的分類を正確に反映しているかどうかは、議論の余地があります。M1/M2マーカーと機能遺伝子を使用して、青LEDおよびNAIO3誘導RDマウスモデルにおけるミクログリア細胞の時空間的変化を調べました。TUNELアッセイは、光受容体細胞死を検出するために実施し、ミクログリア細胞を抗IBA1、P2RY12、CD86、およびCD206抗体で標識しました。FACSを使用して、抗CD206およびCD86抗体でミクログリア細胞を分離し、QRT-PCRを実施してIL-10、IL-6、TREM-2、APOE、およびLYZ2発現を評価しました。TUNEL陽性細胞は、RD誘導後24時間から72時間後の外側核層（ONL）で検出されました。24時間でP2RY12が減少し、CD86が増加し、CD86/CD206二重標識細胞は72時間でドミナント集団を占めました。また、CD86/CD206二重標識細胞は、APOE、TREM2、およびLYZ2レベルの有意な増加を示しましたが、IL-6およびIL-10のレベルは有意ではありませんでした。我々の結果は、活性RDのミクログリア細胞をM1またはM2に分類できず、ミクログリアの大部分は炎症ではなく食作用に関与するCD86とCD206の両方を発現することを示しています。

Microglial cells are the key regulators of inflammation during retinal degeneration (RD) and are conventionally classified as M1 or M2. However, whether the M1/M2 classification exactly reflects the functional classification of microglial cells in the retina remains debatable. We examined the spatiotemporal changes of microglial cells in the blue-LED and NaIO3-induced RD mice models using M1/M2 markers and functional genes. TUNEL assay was performed to detect photoreceptor cell death, and microglial cells were labeled with anti-IBA1, P2RY12, CD86, and CD206 antibodies. FACS was used to isolate microglial cells with anti-CD206 and CD86 antibodies, and qRT-PCR was performed to evaluate Il-10, Il-6, Trem-2, Apoe, and Lyz2 expression. TUNEL-positive cells were detected in the outer nuclear layer (ONL) from 24 h to 72 h post-RD induction. At 24 h, P2RY12 was decreased and CD86 was increased, and CD86/CD206 double-labeled cells occupied the dominant population at 72 h. And CD86/CD206 double-labeled cells showed a significant increase in Apoe, Trem2, and Lyz2 levels but not in those of Il-6 and Il-10. Our results demonstrate that microglial cells in active RD cannot be classified as M1 or M2, and the majority of microglia express both CD86 and CD206, which are involved in phagocytosis rather than inflammation.