miR-216aは、DNMT1を標的とすることにより、COPDの肺微小血管内皮細胞のアポトーシスを減少させます

はじめに：肺微小血管内皮細胞（PMVECS）の異常なアポトーシスがCOPDの病因に関与します。研究では、マイクロRNA（miRNA）が細胞アポトーシスを調節することにより肺疾患の病因に寄与することが示されています。本研究は、COPDにおけるPMVECのタバコ煙抽出物（CSE）によるアポトーシスにおけるmiR-216Aの効果を調査し、潜在的なメカニズムを調査することを目的としています。 方法：肺気腫モデルマウスをCSEおよびCS暴露で治療しました。miR-216AおよびDNAメチルトランスフェラーゼ1（DNMT1）の発現は、肺気腫マウスおよびCOPD患者で評価されました。miR-216a模倣とlenti-dnmt1をpmvecsにトランスフェクトして、基礎となるメカニズムを識別しました。miR-216AおよびDNMT1の発現レベルは、リアルタイムの定量的ポリメラーゼ連鎖反応（RT-QPCR）またはウエスタンブロットによって検出されました。さらに、細胞アポトーシスはフローサイトメトリーアッセイによって調べられました。 結果：結果は、miR-216Aの発現が減少したのに対し、肺気腫マウスおよびCOPD患者の肺組織でDNMT1の発現が増加したことを示しています。さらに、miR-216Aの発現は、CSE処理されたPMVECで有意に減少し、miR-216Aの過剰発現はCSE誘発PMVECアポトーシスを減衰させました。さらに、CSE誘導PMVECSでDNMT1の発現が増加し、CSE刺激PMVECSでのmiR-216Aの過剰発現後に減少しました。ルシフェラーゼレポーターアッセイにより、miR-216AとDNMT1の標的反応が確認されました。また、DNMT1の過剰発現は、CSE誘発PMVECSにおけるmiR-216Aの抗アポトーシス効果を逆転させることができました。 結論：結果は、MIR-216AがCOPDで標的遺伝子DNMT1を直接調節することにより、CSE誘導アポトーシスで重要な役割を果たす可能性があることを示しています。COPDの潜在的な分子としてのmiR-216a/dnmt1の機能に関する洞察を提供します。

INTRODUCTION: Abnormal apoptosis of pulmonary microvascular endothelial cells (PMVECs) participates in the pathogenesis of COPD. Studies have shown that microRNAs (miRNAs) contribute to the pathogenesis of pulmonary diseases by regulating cell apoptosis. The present study aimed to investigate the effects of miR-216a in cigarette smoke extract (CSE)-induced apoptosis of PMVECs in COPD and explore the potential mechanisms. METHODS: The emphysema model mice were treated with CSE and CS exposure. The expression of miR-216a and DNA methyltransferase 1 (DNMT1) was assessed in emphysema mice and COPD patients. The miR-216a mimic and Lenti-DNMT1 were transfected into PMVECs to identify the underlying mechanisms. The expression levels of miR-216a and DNMT1 were detected by real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) or Western blot. Moreover, cell apoptosis was examined by flow cytometry assays. RESULTS: The results show that the expression of miR-216a was decreased, whereas the expression of DNMT1 was increased in the lung tissue of emphysema mice and COPD patients. In addition, the expression of miR-216a was significantly reduced in CSE-treated PMVECs, and the overexpression of miR-216a attenuated CSE-induced PMVEC apoptosis. Furthermore, the expression of DNMT1 was increased in the CSE-induced PMVECs and then was reduced after the overexpression of miR-216a in the CSE-stimulated PMVECs. Luciferase reporter assays confirmed the target reaction between miR-216a and DNMT1. Also, the overexpression of DNMT1 was able to reverse the anti-apoptotic effect of miR-216a in CSE-induced PMVECs. CONCLUSIONS: The results indicate that miR-216a may play a crucial role in CSE-induced apoptosis by directly regulating its target gene DNMT1 in COPD. It provides insights into the function of MiR-216a/DNMT1 as a potential molecule in COPD.