多剤耐性トランスポーターP糖タンパク質は、フェロプトーシス誘導剤に対する耐性を付与します

AIM：フェロプトーシスは、致死脂質過酸化によって引き起こされる細胞死の非アポトーシス形態です。いくつかの小分子フェロショー症誘導因子（FIN）が報告されていますが、ATP結合カセット（ABC）トランスポーターP糖タンパク質（P-GP、ABCB1）およびABCG2との相互作用に関する情報はほとんど利用できません。したがって、私たちは、FINとP-gpおよびABCG2との相互作用を特徴付けようとしました。これは、経口バイオアベイラビリティと脳の浸透に関する情報を提供し、薬物薬物の相互作用を予測する可能性があります。方法：P-GPまたはABCG2を発現するためにトランスポーターにトランスフェクトされたフェロプトーシス感受性A673細胞を使用した細胞毒性アッセイを使用して、トランスポーターがFINに対する耐性を付与する能力を決定しました。確認研究は、OVCAR8およびNCI/ADR-RES細胞で実施されました。P-gpまたはABCG2を阻害するFINSの能力は、それぞれ蛍光基質であるRhodamine 123またはPurpuin-18を使用して決定されました。結果：P-gpの過剰発現は、FIN56およびエラスチン誘導体イミダゾールケトンエラスチンとピペラジンエラスチンに対する耐性を付与しました。Imidazole Ketone ErastinおよびPiperazine Erastinに対するP-gpを介した耐性も、ABCB1のCRISPRを介したノックアウトにより、UO-31腎癌細胞でも逆転しました。10 µMのFINS ML-162、GPX阻害剤26A、およびPACMA31は、P-GP発現MDR-19細胞で10倍以上の細胞内ローダミン123蛍光を増加させることができました。GPX阻害剤26Aは、ABCG2発現R-5細胞で細胞内パープリン-18蛍光を4倍以上増加させることができました。結論：P-gpの発現は、輸送体を発現する癌におけるこれらのフィンの有効性を低下させ、脳などの聖域サイトへのアクセスを妨げる可能性があります。一部のFINがP-GPとABCG2を阻害する能力は、潜在的な薬物薬物相互作用を示唆しています。

Aim: Ferroptosis is a non-apoptotic form of cell death caused by lethal lipid peroxidation. Several small molecule ferroptosis inducers (FINs) have been reported, yet little information is available regarding their interaction with the ATP-binding cassette (ABC) transporters P-glycoprotein (P-gp, ABCB1) and ABCG2. We thus sought to characterize the interactions of FINs with P-gp and ABCG2, which may provide information regarding oral bioavailability and brain penetration and predict drug-drug interactions. Methods: Cytotoxicity assays with ferroptosis-sensitive A673 cells transfected to express P-gp or ABCG2 were used to determine the ability of the transporters to confer resistance to FINs; confirmatory studies were performed in OVCAR8 and NCI/ADR-RES cells. The ability of FINs to inhibit P-gp or ABCG2 was determined using the fluorescent substrates rhodamine 123 or purpuin-18, respectively. Results: P-gp overexpression conferred resistance to FIN56 and the erastin derivatives imidazole ketone erastin and piperazine erastin. P-gp-mediated resistance to imidazole ketone erastin and piperazine erastin was also reversed in UO-31 renal cancer cells by CRISPR-mediated knockout of ABCB1. The FINs ML-162, GPX inhibitor 26a, and PACMA31 at 10 µM were able to increase intracellular rhodamine 123 fluorescence over 10-fold in P-gp-expressing MDR-19 cells. GPX inhibitor 26a was able to increase intracellular purpurin-18 fluorescence over 4-fold in ABCG2-expressing R-5 cells. Conclusion: Expression of P-gp may reduce the efficacy of these FINs in cancers that express the transporter and may prevent access to sanctuary sites such as the brain. The ability of some FINs to inhibit P-gp and ABCG2 suggests potential drug-drug interactions.