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STAR protocols2023Nov21Vol.4issue(4)

i-motif固有のナノボディの生産と浄化のためのプロトコル

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文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

挿入されたモチーフまたはImotif(IMS)は、細胞に富むシーケンスによって形成される核酸構造であり、細胞プロセスを調節し、そのpH依存性のためにナノテクノロジーに広範なアプリケーションを持っている可能性があります。シーケンスに関係なくIM DNA構造を認識できるIM固有のナノボディ(IMBody)を開発しました。ここでは、バクテリアの発現とIMBodyのHISタグの浄化のためのプロトコルを提供します。次に、IMBodyを使用してELISAと免疫染色を実行する手順について説明します。

挿入されたモチーフまたはImotif(IMS)は、細胞に富むシーケンスによって形成される核酸構造であり、細胞プロセスを調節し、そのpH依存性のためにナノテクノロジーに広範なアプリケーションを持っている可能性があります。シーケンスに関係なくIM DNA構造を認識できるIM固有のナノボディ(IMBody)を開発しました。ここでは、バクテリアの発現とIMBodyのHISタグの浄化のためのプロトコルを提供します。次に、IMBodyを使用してELISAと免疫染色を実行する手順について説明します。

Intercalated motifs or i-Motifs (iMs) are nucleic acid structures formed by cytosine-rich sequences, which may regulate cellular processes and have broad applications in nanotechnology due to their pH-dependent nature. We have developed an iM-specific nanobody (iMbody) that can recognize iM DNA structures regardless of their sequences, making it a versatile research tool for studying iMs in various contexts. Here, we provide a protocol for the bacterial expression and His-tag purification of iMbody. We then describe procedures for performing ELISA and immunostaining using iMbody.

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