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Osmanthus Fragransは、心地よい花の香りのために有名な装飾用の樹木種です。モノテルペノイドは、O。fragransの花の核となる花柄の揮発性物質であり、途方もない商業的価値を持っています。ゲラニル二リン酸シンターゼ(GPPS)は、モノテルペノイドの前駆体であるGPPの形成を触媒する重要な酵素です。ただし、O。fragransにはgppssの報告はありません。ここでは、O。フレグランの花でRNAシーケンスを実行し、3つのGPPSを特定しました。系統樹の分析により、OFLSU1/2はGPPS.LSUブランチに属し、OFSSUIIはGPPS.SSUブランチに属していることが示されました。oflsu1、oflsu2、およびofssuiiはすべて葉緑体に局在していました。Y2Hおよびプルダウンアッセイは、OFLSU1またはOFLSU2がOFSSUIIと相互作用してヘテロマーGPPSを形成することを示しました。部位変異実験により、OFLSU1/2およびOFSSUIIの保存されたCXXXCモチーフが、OFLSU1/2とOFSSUIIの相互作用に不可欠であることが明らかになりました。一時的な発現実験により、OFLSU1、OFLSU2およびOFSSUIIは、モノテルペンシンターゼ遺伝子OFTPS1またはOFTPS2と共発現したことが示されました。OFLSU1/2によって形成されたヘテロマーGPPSは、OFSSUIIと相互作用することにより、モノテルペノイドの生合成をさらに改善します。全体として、これらの予備的な結果は、GPPSがO. fragransでの芳香族モノテルペンの生産を調節する上で重要な役割を果たすことを示唆しています。
Osmanthus Fragransは、心地よい花の香りのために有名な装飾用の樹木種です。モノテルペノイドは、O。fragransの花の核となる花柄の揮発性物質であり、途方もない商業的価値を持っています。ゲラニル二リン酸シンターゼ(GPPS)は、モノテルペノイドの前駆体であるGPPの形成を触媒する重要な酵素です。ただし、O。fragransにはgppssの報告はありません。ここでは、O。フレグランの花でRNAシーケンスを実行し、3つのGPPSを特定しました。系統樹の分析により、OFLSU1/2はGPPS.LSUブランチに属し、OFSSUIIはGPPS.SSUブランチに属していることが示されました。oflsu1、oflsu2、およびofssuiiはすべて葉緑体に局在していました。Y2Hおよびプルダウンアッセイは、OFLSU1またはOFLSU2がOFSSUIIと相互作用してヘテロマーGPPSを形成することを示しました。部位変異実験により、OFLSU1/2およびOFSSUIIの保存されたCXXXCモチーフが、OFLSU1/2とOFSSUIIの相互作用に不可欠であることが明らかになりました。一時的な発現実験により、OFLSU1、OFLSU2およびOFSSUIIは、モノテルペンシンターゼ遺伝子OFTPS1またはOFTPS2と共発現したことが示されました。OFLSU1/2によって形成されたヘテロマーGPPSは、OFSSUIIと相互作用することにより、モノテルペノイドの生合成をさらに改善します。全体として、これらの予備的な結果は、GPPSがO. fragransでの芳香族モノテルペンの生産を調節する上で重要な役割を果たすことを示唆しています。
Osmanthus fragrans is a famous ornamental tree species for its pleasing floral fragrance. Monoterpenoids are the core floral volatiles of O. fragrans flowers, which have tremendous commercial value. Geranyl diphosphate synthase (GPPS) is a key enzyme that catalyzes the formation of GPP, the precursor of monoterpenoids. However, there are no reports of GPPSs in O. fragrans. Here, we performed RNA sequencing on the O. fragrans flowers and identified three GPPSs. Phylogenetic tree analysis showed that OfLSU1/2 belonged to the GPPS.LSU branch, while the OfSSUII belonged to the GPPS.SSU branch. OfLSU1, OfLSU2 and OfSSUII were all localized in chloroplasts. Y2H and pull-down assays showed that OfLSU1 or OfLSU2 interacted with OfSSUII to form heteromeric GPPSs. Site mutation experiments revealed that the conserved CXXXC motifs of OfLSU1/2 and OfSSUII were essential for the interaction between OfLSU1/2 and OfSSUII. Transient expression experiments showed that OfLSU1, OfLSU2 and OfSSUII co-expressed with monoterpene synthase genes OfTPS1 or OfTPS2 improved the biosynthesis of monoterpenoids (E)-β-ocimene and linalool. The heteromeric GPPSs formed by OfLSU1/2 interacting with OfSSUII further improves the biosynthesis of monoterpenoids. Overall, these preliminary results suggested that the GPPSs play a key role in regulating the production of aromatic monoterpenes in O. fragrans.
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