脂質ナノ粒子からのmRNA抽出

メッセンジャーリボ核酸（mRNA）ワクチンは最近、予防ワクチンと治療ワクチンの両方にかなりの約束を示しています。これらのワクチンは抗原を運ぶのではなく、細胞機械を使用してそれを生成するための情報を持ち、人体を抗原工場に変えます。ただし、mRNAは不安定な分子であり、エクソヌクレアーゼおよびエンドヌクレアーゼによる物理的、化学的、酵素的分解の影響を受けやすいです。mRNAが分解された場合、それはもはや関心のある抗原に正しく翻訳することができず、ワクチンはその有効性を失います。ヌクレアーゼの分解から保護し、細胞に入るようにするために、mRNAを脂質ナノ粒子（LNP）にカプセル化することができます。製造プロセスの一環として、mRNAの品質は、カプセル化の前に（薬物物質段階）、最終ワクチン製品の製剤後（医薬品段階で）制御する必要があります。したがって、LNPからmRNAを抽出できること、つまり最終的なワクチン製品を変形させる必要があります。この作業では、スピンカラム抽出、磁気粒子抽出、有機抽出、直接破壊など、さまざまな変形方法が比較されています。これらの各メソッドの利点と短所が強調されています。

Messenger RiboNucleic Acid (mRNA) vaccines have recently shown considerable promises for both prophylactic and therapeutic vaccines. These vaccines do not carry an antigen but the information for producing it using the cell machinery, turning the human body into an antigen factory. However, mRNA is an unstable molecule, susceptible to physical, chemical and enzymatic degradation by exo- and endonucleases. If the mRNA is degraded, it can no longer be translated correctly into the antigen of interest and the vaccine lose its efficacy. To protect from nucleases degradation and allow it to get into the cells, mRNA can be encapsulated in lipid nanoparticles (LNPs). As part of the manufacturing process, the quality of the mRNAs should be controlled before the encapsulation (at the drug substance stage) as well as after formulation on the final vaccine product (at the drug product stage). Therefore, it is necessary to be able to extract the mRNA from the LNPs, that is to deformulate the final vaccine product. In this work, different deformulation methods have been compared: spin column extraction, magnetic particle extraction, organic extraction, and direct disruption. Advantages and disadvantages of each of these methods are highlighted.