リンカーヒストンH1-4の機能を調査するためのマウス胚性幹細胞モデルの開発

リンカーヒストンH1 C末端ドメイン（CTD）は、クロマチン凝縮において極めて重要な役割を果たします。H1.4のCTDコーディング領域内のDe Novo Frameshift変異は、最近、知的障害と過成長を引き起こす神経疾患であるRahman症候群に関連していると報告されています。ラーマン症候群のメカニズムと病因を調査するために、マウス胚性幹細胞（MESC）およびCRISPR/Cas9ゲノムエンジニアリングを使用した細胞モデルを開発しました。私たちの設計されたMES細胞は、H1-4ダイナミクス、免疫沈降、核局在などの詳細な調査を促進します。さらに、Photoactivatable GFP（PA-GFP）とPulldownアッセイを容易にするHAタグで変異体H1-4にタグを付けました。これらの操作された細胞をマウスモデルの開発に使用して、H1-4タンパク質のin vivoの役割を研究できると予想しています。

The linker histone H1 C-terminal domain (CTD) plays a pivotal role in chromatin condensation. De novo frameshift mutations within the CTD coding region of H1.4 have recently been reported to be associated with Rahman syndrome, a neurological disease that causes intellectual disability and overgrowth. To investigate the mechanisms and pathogenesis of Rahman syndrome, we developed a cellular model using murine embryonic stem cells (mESCs) and CRISPR/Cas9 genome engineering. Our engineered mES cells facilitate detailed investigations, such as H1-4 dynamics, immunoprecipitation, and nuclear localization; in addition, we tagged the mutant H1-4 with a photoactivatable GFP (PA-GFP) and an HA tag to facilitate pulldown assays. We anticipate that these engineered cells could also be used for the development of a mouse model to study the in vivo role of the H1-4 protein.