後天性皮膚色素沈着を防ぐための戦略として、CREBおよびCRTCのリン酸化回路をターゲットにする

背景：cAMP応答要素結合タンパク質（CREB）およびCREB調節転写コアクチベーター（CRTC）は、生物発生、色素沈着、および色素沈着、および色素沈着、および色素沈着、および色素沈着、および色素沈着のマスター調節因子であるマイクロプレオミア関連転写因子サブタイプM（MITF-M）の転写活性化に協力します。表皮メラニン細胞でのメラノソームの移動。ここでは、MITF-Mの発現におけるCREBおよびCRTCのリン酸化回路のターゲティングを提案します。方法：ヒト表皮メラノサイト細胞、マウス皮膚、およびマウスメラノーマ細胞を使用し、適用されたウエスタンブロッティング、逆転写 - ポリメラーゼ連鎖反応、免疫沈降および共焦点顕微鏡検査を実施しました。結果：この研究は、α-メラノサイト刺激ホルモン（α-MSH）誘導メラニン形成プログラムが、PKA-AMP活性化プロテインキナーゼではなく、タンパク質キナーゼA-Salt誘導キナーゼ（PKA-SIK）の軸をオンにすることができることを示唆しました（PKA-AMPK）MITF-Mの発現におけるCRTCの脱リン酸化中。AMPK阻害剤ではなくSIK阻害剤は、細胞外メラニン性刺激の非存在下でメラニン培養のメラニン産生を刺激し、SIK阻害剤はCRTCの脱リン酸化を増加させたが、MITF-Mの発現のためのCREBのリン酸化をバイパスした。Yaku Aによる治療は、マウスにおける紫外線B（UV-B）照射皮膚の色素沈着を予防し、α-MSHまたはSIK阻害剤活性化メラニン細胞培養でメラニン産生を阻害しました。機械的に、Yakuは、α-Msh-Msh-Msh-Msh-Msh-MSH-in CrtCSのCRTCSのCRTCSのPKA触媒のリン酸化と結合したPKA触媒リン酸化CREBの上流でのPKAホロエンザイムのi）cAMP依存性解離を二重に標的とすることにより、MITF-Mの発現を抑制しました。誘発されたメラニン形成プログラム、およびII）CRTCのSIK阻害剤による脱リン酸化後のCRTCの核輸入。結論：MITF-Mの発現におけるCREBおよびCRTCの標的リン酸化回路は、皮膚の色素障害を防ぐための適切な戦略である可能性があります。

Background: The cAMP response element-binding protein (CREB) and CREB-regulated transcription coactivators (CRTCs) cooperate in the transcriptional activation of microphthalmia-associated transcription factor subtype M (MITF-M) that is a master regulator in the biogenesis, pigmentation and transfer of melanosomes at epidermal melanocytes. Here, we propose the targeting of phosphorylation circuits on CREB and CRTCs in the expression of MITF-M as the rationale to prevent skin hyperpigmentation by elucidating the inhibitory activity and mechanism of yakuchinone A (Yaku A) on facultative melanogenesis. Methods: We employed human epidermal melanocyte cell, mouse skin, and mouse melanoma cell, and applied Western blotting, reverse transcription-polymerase chain reaction, immunoprecipitation and confocal microscopy to conduct this study. Results: This study suggested that α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH)-induced melanogenic programs could switch on the axis of protein kinase A-salt inducible kinases (PKA-SIKs) rather than that of PKA-AMP activated protein kinase (PKA-AMPK) during the dephosphorylation of CRTCs in the expression of MITF-M. SIK inhibitors rather than AMPK inhibitors stimulated melanin production in melanocyte cultures in the absence of extracellular melanogenic stimuli, wherein SIK inhibitors increased the dephosphorylation of CRTCs but bypassed the phosphorylation of CREB for the expression of MITF-M. Treatment with Yaku A prevented ultraviolet B (UV-B)-irradiated skin hyperpigmentation in mice and inhibited melanin production in α-MSH- or SIK inhibitor-activated melanocyte cultures. Mechanistically, Yaku A suppressed the expression of MITF-M via dually targeting the i) cAMP-dependent dissociation of PKA holoenzyme at the upstream from PKA-catalyzed phosphorylation of CREB coupled with PKA-SIKs axis-mediated dephosphorylation of CRTCs in α-MSH-induced melanogenic programs, and ii) nuclear import of CRTCs after SIK inhibitor-induced dephosphorylation of CRTCs. Conclusions: Taken together, the targeting phosphorylation circuits on CREB and CRTCs in the expression of MITF-M could be a suitable strategy to prevent pigmentary disorders in the skin.